摘要 |
本发明提供使用唯一引物来完成PCR或RT-PCR的方法及其应用,整个反应的引物为唯一的根据模板DNA链顺序特征而设计的寡聚核苷酸链,引物3'端6-12个碱基与模板顺序完全互补,而5'端则采用柔性设计。突破了经典PCR理论中使用一对引物完成扩增的技术常规,克服了由于正反引物对模板DNA链的结合效率有所不同可能造成的对扩增效率的负面影响,也完全避免了正反引物间的3'端碱基的互补。适合应用于人类和病原微生物基因的PCR或RT-PCR检测,也可用于多重RCP或RT-PCR反应以减少引物间的相互影响,或者作为其他PCR/RT-PCR的内参照反应,减少了一对引物作为内参照时的引物间影响和扩增效率差异,有助获得可靠的定量或半定量结果。 |