| 主权项 |
1.一种用以调节外源基因表现之方法,其包含将包 含下列之蜕皮激素受体复合物: a)DNA结合功能域; b)配位子结合功能域; c)反式活化作用功能域;及 d)具式I之配位子: 其中: E为含有第三级碳之(C4-C6)烷基或含有第三级碳之 氰基(C3-C5)烷基; R1为H、Me、Et、i-Pr、F、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2、 CH2F、CH2C1、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔丙 基、2-炔丙基、乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、CF2 CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、SCN、或SCHF2; R2为H、Me、Et、n-Pr、i-Pr、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2 、CH2F、CH2C1、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、Ac、F、C1、OH、OMe、OEt 、O-n-Pr、OAc、NMe2、NEt2、SMe、SEt、SOCF3、OCF2CF2H、 COEt、环丙基、CF2CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、 OCF3、OCHF2、O-i-Pr、SCN、SCHF2或SOMe,或与R3及接附至R 2与R3之苯基碳接合,而形成乙烯二氧基、具有相邻 于苯基碳之氧的二氢喃环、或具有相邻于苯基 碳之氧的二氢喃环; R3为H、Et、或与R2及接附至R2与R3之苯基碳接合,而 形成乙烯二氧基、具有相邻于苯基碳之氧的二氢 喃环、或具有相邻于苯基碳之氧的二氢喃环; R4、R5与R6独立地为H、Me、Et、F、Cl、Br、甲醯基、 CF3、CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、Ac、F、Cl、OH、OMe、OEt 、SMe、或SEt; 其条件为: a)当R1为Me且R2为OMe时; 则R3为H;且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me、3,5-二-OMe-4-Me 、3,5-二-C1-或3,5-二-F; b)当R1为Me且R2为OEt时; 则R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me、3,5-二-OMe-4-Me 、3,5-二-C1、或3,5-二-F、2,4-或2,5-二-F、2,4-或2,5-二 -Cl; c)当R1为Et且R2为OMe或OEt时; 则R3为H且组合R4、R5与R6为 i)3,5-二-Me、3,5-二-Cl、或3,5-二-F、2,4-或2,5-二-F、2, 4-或2,5-二-Cl、3-OMe、2-Cl-5-Me、2-Br-5-Me、2-Cl、2-Br、 或3-Me;或 ii)R6为H、R4为Me且R5为Et、F、Cl、Br、甲醯基、CF3、 CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CN、C≡CH、1-炔丙基 、2-炔丙基、乙烯基、OMe、OEt、SMe、或SEt; d)当R1为i-Pr时; 则R2为OMe、或OEt;R3为H;且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; e)当R3为Et时; 则R2为H;R1为F或Cl,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; f)当R2及R3共同与接附至彼等之苯基碳形成乙烯二 氧基时; 则R1为OMe或OEt,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; g)当R2及R3共同与接附至彼等之苯基碳形成二氢 喃或二氢喃环时; 则R1为OEt,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; h)当R1为甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH 、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔丙基、2-炔丙基、 乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、CF2CF3、CH=CHCN、烯 丙基、叠氮基、SCN、或SCHF2时; 则R2为OMe、或OEt,R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; i)当R2为Me、Et、n-Pr、i-Pr、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2 、CH2F、CH2C1、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、 CF2CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、OCF3、OCHF2、O-i-Pr 、SCN、SCHF2或NH-CN时; 则R1为t,R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me;与包含下 列之DNA构筑物接触: a)外源基因;及 b)反应元件; 其中: a)该外源基因系处于该反应元件之调控下;且 b)该DNA结合功能域于该配位子存在下,与该反应元 件之结合作用,导致该基因的活化或压制作用。 2.一种于个体中调节一或多种外源基因表现之组 合物,其包含有效量具下式之配位子: 其中: E为含有第三级碳之(C4-C6)烷基或含有第三级碳之 氰基(C3-C5)烷基; R1为H、Me、Et、i-Pr、F、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2、 CH2F、CH2Cl、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔丙 基、2-炔丙基、乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、CF2 CF3、CH= CHCN、烯丙基、叠氮基、SCN、或SCHF2: R2为H、Me、Et、n-Pr、i-Pr、甲醯基、CF、CHF2、CHC12 、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C=CH、1-炔丙 基、2-炔丙基、乙烯基、Ac、F、Cl、OH、OMe、OEt、O -n-Pr、OAc、NMe2、NEt2、SMe、SEt、SOCF3、OCF2CF2H、COEt 、环丙基、CF2CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、OCF3 、OCHF2、O-i-Pr、SCN、SCHF2或SOMe、或与R3及接附至R2 与R3之苯基碳接合,而形成乙烯二氧基、具有相邻 于苯基碳之氧的二氢喃环、或具有相邻于苯基 碳之氧的二氢喃环; R3为H、Et、或与R2及接附至R2与R3之苯基碳接合,而 形成乙烯二氧基、具有相邻于苯基碳之氧的二氢 喃环、或具有相邻于苯基碳之氧的二氢喃环; R4、R5与R6独立地为H、Me、Et、F、Cl、Br、甲醯基、 CF3、CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、Ac、F、Cl、OH、OMe、OEt 、SMe、或SEt; 其条件为: a)当R1为Me且R2为OMe时; 则R3为H;且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me、3,5-二-OMe-4-Me 、3,5-二-Cl、或3,5-二-F; b)当R1为Me且R2为OEt时; 则R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me、3,5-二-OMe-4-Me 、3,5-二-Cl、或3,5-二-F、2,4-或2,5-二-F、2,4-或2,5-二 -Cl; c)当R1为Et且R2为OMe或OEt时; 则R3为H且组合R4、R5与R6为 i)3,5-二-Me、3,5-二-Cl、或3,5-二-F、2,4-或2,5-二-F、2, 4-或2,5-二-Cl、3-OMe、2-Cl-5-Me、2-Br-5-Me、2-Cl、2-Br、 或3-Me;或 ii)R6为H、R4为Me且R5为Et、F、C1、Br、甲醯基、CF3、 CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CN、C≡CH、1-炔丙基 、2-炔丙基、乙烯基、OMe、OEt、SMe、或SEt; d)当R1为i-Pr时; 则R2为OMe、或OEt;R3为H;且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; e)当R3为Et时; 则R2为H;R1为F或Cl,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; f)当R2及R3共同与接附至彼等之苯基碳形成乙烯二 氧基时; 则R1为OMe或OEt,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; g)当R2及R3共同与接附至彼等之苯基碳形成二氢 喃或二氢喃环时; 则R1为OEt,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; h)当R1为甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH 、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔丙基、2-炔丙基、 乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、CF2CF3、CH=CHCN、烯 丙基、叠氮基、SCN、或SCHF2时; 则R2为OMe、或OEt,R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; i)当R2为Me、Et、n-Pr、i-Pr、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2 、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、 CF2CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、OCF3、OCHF2、O-i-Pr 、SCN、SCHF2或NH-CN时; 则R1为t,R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me;且其中该 个体之细胞含有: a)包含下列之蜕皮激素受体复合物: 1)DNA结合功能域; 2)配位子结合功能域; 3)反式活化作用功能域;及 b)包含下列之DNA构筑物: 1)外源基因;及 2)反应元件;且 其中: a)该外源基因系处于该反应元件之调控下;且 b)该DNA结合功能域于该配位子存在下,与该反应元 件之结合作用,导致该基因的活化或压制作用。 3.一种供制造多之方法,其包含下列步骤: a)选择实质上对暴露至具下式之配位子不具敏感 性的细胞: 其中: E为含有第三级碳之(C4-C6)烷基或含有第三级碳之 氰基(C3-C5)烷基; R1为H、Me、Et、i-Pr、F、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2、 CH2F、CH2Cl、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔丙 基、2-炔丙基、乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、CF2 CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、SCN、或SCHF2; R2为H、Me、Et、n-Pr、i-Pr、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2 、CH2F、CH2C1、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、Ac、F、Cl、OH、OMe、OEt 、O-n-Pr、OAc、NMe2、NEt2、SMe、SEt、SOCF3、OCF2CF2H、 COEt、环丙基、CF2CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、 OCF3、OCHF2、O-i-Pr、SCN、SCHF2或SOMe、或与R3及接附 至R2与R3之苯基碳接合,而形成乙烯二氧基、具有 相邻于苯基碳之氧的二氢喃环、或具有相邻于 苯基碳之氧的二氢喃环; R3为H、Et、或与R2及接附至R2与R3之苯基碳接合,而 形成乙烯二氧基、具有相邻于苯基碳之氧的二氢 喃环、或具有相邻于苯基碳之氧的二氢喃环; R4、R5与R6独立地为H、Me、Et、F、Cl、Br、甲醯基、 CF3、CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、Ac、F、Cl、OH、OMe、OEt 、SMe、或SEt; 其条件为: a)当R1为Me且R2为OMe时; 则R3为H;且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me、3,5-二-OMe-4-Me 、3,5-二-Cl、或3,5-二-F; b)当R1为Me且R2为OEt时; 则R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me、3,5-二-OMe-4-Me 、3,5-二-Cl、或3,5-二-F、2,4-或2,5-二-F、2,4-或2,5-二 -Cl; c)当R1为Et且R2为OMe或OEt时; 则R3为H且组合R4、R5与R6为 i)3,5-二-Me、3,5-二-Cl、或3,5-二-F、2,4-或2,5-二-F、2, 4-或2,5-二-Cl、3-OMe、2-Cl-5-Me、2-Br-5-Me、2-Cl、2-Br、 或3-Me;或 ii)R6为H、R4为Me且R5为Et、F、C1、Br、甲醯基、CF3、 CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CN、C≡CH、1-炔丙基 、2-炔丙基、乙烯基、OMe、OEt、SMe、或SEt; d)当R1为i-Pr时; 则R2为OMe、或OEt;R3为H;且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; e)当R3为Et时; 则R2为H;R1为F或Cl,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; f)当R2及R3共同与接附至彼等之苯基碳形成乙烯二 氧基时; 则R1为OMe或OEt,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; g)当R2及R3共同与接附至彼等之苯基碳形成二氢 喃或二氢喃环时; 则R1为OEt,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; h)当R1为甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2、CH2F、CH2C1、CH2OH 、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔丙基、2-炔丙基、 乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、CF2CF3、CH=CHCN、烯 丙基、叠氮基、SCN、或SCHF2时; 则R2为OMe、或OEt,R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; i)当R2为Me、Et、n-Pr、i-Pr、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2 、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、 CF2CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、OCF3、OCHF2、O-i-Pr 、SCN、SCHF2或NH-CN时; 则R1为t,R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; b)将下列物质导入该细胞中: 1)一种包含下列之DNA构筑物: a)编码该多之外源基因;及 b)反应元件; 其中该外源基因系处于该反应元件之调控下;及 2)包含下列之蜕皮激素受体复合物: a)DNA结合功能域; b)配位子结合功能域; c)反式活化作用功能域;及 c)将该细胞暴露至该配位子。 4.一种用以于转殖基因生物体中调节外源或异源 基因表现之组合物,其包含具下式之配位子: 其中: E为含有第三级碳之(C4-C6)烷基或含有第三级碳之 氰基(C3-C5)烷基; R1为H、Me、Et、i-Pr、F、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2、 CH2F、CH2Cl、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔丙 基、2-炔丙基、乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、CF2 CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、SCN、或SCHF2; R2为H、Me、Et、n-Pr、i-Pr、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2 、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、Ac、F、Cl、OH、OMe、OEt 、O-n-Pr、OAc、NMe2、NEt2、SMe、SEt、SOCF3、OCF2CF2H、 COEt、环丙基、CF2CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、 OCF3、OCHF2、O-i-Pr、SCN、SCHF2或SOMe、或与R3及接附 至R2与R3之苯基碳接合,而形成乙烯二氧基、具有 相邻于苯基碳之氧的二氢喃环、或具有相邻于 苯基碳之氧的二氢喃环; R3为H、Et、或与R2及接附至R2与R3之苯基碳接合,而 形成乙烯二氧基、具有相邻于苯基碳之氧的二氢 喃环、或具有相邻于苯基碳之氧的二氢喃环; R4、R5与R6独立地为H、Me、Et、F、Cl、Br、甲醯基、 CF3、CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、Ac、F、Cl、OH、OMe、OEt 、SMe、或SEt; 其条件为: a)当R1为Me且R2为OMe时; 则R3为H;且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me、3,5-二-OMe-4-Me 、3,5-二-Cl、或3,5-二-F; b)当R1为Me且R2为OEt时; 则R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me、3,5-二-OMe-4-Me 、3,5-二-Cl、或3,5-二-F、2,4-或2,5-二-F、2,4-或2,5-二 -Cl; c)当R1为Et且R2为OMe或OEt时; 则R3为H且组合R4、R5与R6为 i)3,5-二-Me、3,5-二-Cl、或3,5-二-F、2,4-或2,5-二-F、2, 4-或2,5-二-Cl、3-OMe、2-Cl-5-Me、2-Br-5-Me、2-Cl、2-Br、 或3-Me:或 ii)R6为H、R4为Me且R5为Et、F、Cl、Br、甲醯基、CF3、 CHF2、CHCl2、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CN、C≡CH、1-炔丙基 、2-炔丙基、乙烯基、OMe、OEt、SMe、或SEt; d)当R1为i-Pr时; 则R2为OMe、或OEt;R3为H;且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; e)当R3为Et时; 则R2为H;R1为F或C1,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; f)当R2及R3共同与接附至彼等之苯基碳形成乙烯二 氧基时; 则R1为OMe或OEt,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; g)当R2及R3共同与接附至彼等之苯基碳形成二氢 喃或二氢喃环时; 则R1为OEt,且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; h)当R1为甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2、CH2F、CH2C1、CH2OH 、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔丙基、2-炔丙基、 乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、CF2CF3、CH=CHCN、烯 丙基、叠氮基、SCN、或SCHF2时; 则R2为OMe、或OEt,R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; i)当R2为Me、Et、n-Pr、i-Pr、甲醯基、CF3、CHF2、CHCl2 、CH2F、CH2Cl、CH2OH、CH2OMe、CH2CN、CN、C≡CH、1-炔 丙基、2-炔丙基、乙烯基、OH、OMe、OEt、环丙基、 CF2CF3、CH=CHCN、烯丙基、叠氮基、OCF3、OCHF2、O-i-Pr 、SCN、SCHF2或NH-CN时; 则R1为t,R3为H且组合R4、R5与R6为3,5-二-Me; 且其中将该配位子与存在该生物体细胞中之蜕皮 激素受体复合物接触,其中该细胞又含有供当与该 配位子组合之蜕皮激素受体复合物的DNA结合序列, 且其中蜕皮激素受体复合物-配位子-DNA结合序列 复合物之形成,会诱发该基因的表现。 5.根据申请专利范围第1或3项之方法,其中该配位 子具有所特定之分子式,且E为第三-丁基;R1为Me、Et 、i-Pr、或F;R2为OH、OMe、OEt、或与R3及接附至R2与R3 之苯基碳接合,而形成乙烯二氧基、或具有相邻于 苯基碳之氧的二氢喃环;R3为H、Et、或与R2及接 附至R2与R3之苯基碳接合,而形成乙烯二氧基、具 有相邻于苯基碳之氧的二氢喃环;R4、R5与R6独立 地为Me、F、Cl、CH2OH、或OMe。 6.根据申请专利范围第1或3项之方法,其中该配位 子具有所特定之分子式,且E为第三-丁基,R1为Et,R2 为OEt,R3为H,组合R4、R5与R6为3,5-二-Me。 7.根据申请专利范围第1或3项之方法,其中该蜕皮 激素受体复合物为杂合型蜕皮激素受体复合物,且 该DNA构筑物进一步包含启动子。 8.根据申请专利范围第2项之组合物,其中该个体为 植物。 9.根据申请专利范围第2项之组合物,其中该个体为 哺乳动物。 10.根据申请专利范围第2或4项之组合物,其中该配 位子具有所特定之分子式,且E为第三-丁基;R1为Me 、Et、i-Pr、或F;R2为OH、OMe、OEt、或与R3及接附至R2 与R3之苯基碳接合,而形成乙烯二氧基、或具有相 邻于苯基碳之氧的二氢喃环;R3为H、Et、或与R2 及接附至R2与R3之苯基碳接合,而形成乙烯二氧基 、具有相邻于苯基碳之氧的二氢喃环;R4、R5与R6 独立地为Me、F、Cl、CH2OH、或OMe。 11.根据申请专利范围第2或4项之组合物,其中该配 位子具有所特定之分子式,且E为第三-丁基,R1为Et,R 2为OEt,R3为H,组合R4、R5与R6为3,5-二-Me。 12.根据申请专利范围第2或4项之组合物,其中该蜕 皮激素受体复合物为杂合型蜕皮激素受体复合物, 且该DNA构筑物进一步包含启动子。 |
