TRANSFECTION METHOD FOR MAMMALIAN CELLS

摘要

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur transienten Expression von (Poly)peptiden in Säugerzellen, wobei man die folgenden Schritte durchführt: (a) Züchtung von Säugerzellen in einem Medium, das aus Calcium-freiem, mit Vitaminen und Aminosäuren supplementiertem DMEM und Freestyle<TM> Medium in einem Volumenverhältnis von 30:70 bis 70:30 besteht; (b) Transfektion der in Schritt (a) genannten Säugerzellen mit einem das (Poly)peptid kodierenden und exprimierbaren Nucleinsäuremolekül in Calcium-freiem DMEM unter Verwendung von Polyethylenimin; und (c) Züchtung der in Schritt (b) transfizierten Säugerzellen. Bevorzugt ist dabei, dass die Transfektion in Schritt (b) in einem Pilot- oder Produktionsbioreaktor durchgeführt wird. Ferner betrifft die Erfindung ein Kulturmedium, das das aus Calcium-freiem, mit Vitaminen und Aminosäuren supplementiertern DMEM und Freestyle<TM> Medium in einem Volumenverhältnis von 30:70 bis 70:30 besteht.