水中痕量微囊藻毒素的检测方法

摘要

本发明公开了一种测定水中痕量微囊藻毒素的简便常规检测方法，它采用微波处理浓缩水样，用75％的甲醇作为藻细胞中微囊藻毒素MCLR的提取剂，用OasisHLB固相萃取柱纯化样品，用甲醇∶水(体积比)＝80∶20的含2％氨水的溶液作为固相萃取洗脱液，用甲醇∶水(体积比)＝40∶60的含2％醋酸的溶液作为固相萃取淋洗液，用液相色谱紫外检测器测定微囊藻毒素MCLR的含量；该方法线性范围0.1－20mg/L，线性相关系数为0.9999，最小检测量为2ng；方法的回收率82％以上，日内和日间RSD分别小于0.64％和2.4％；本发明重现性好，能够方便灵敏的测定水中和藻细胞中痕量微囊藻毒素MCLR。

主权项

1、一种水中痕量微囊藻毒素MCLR的检测方法，其特征在于该方法按下列步骤顺序进行：(1)、水样的预处理：取水样，用离心机获得上清液(A)和藻细胞并分别保存，待用；(2)、藻细胞的处理：将藻细胞转移至研钵中，用75％的甲醇作为藻细胞中微囊藻毒素MCLR的提取剂，经研磨后用离心机获取上清液(B)待用；(3)、样品的浓缩：将上清液(A)加热，缩短至10mL左右，获得溶液(C)；将上清液(B)和溶液(C)放入氮吹仪中，用氮气吹脱浓缩至1mL左右。(4)、样品的纯化：取Water公司Oasis HLB固相萃取柱，加入1mL纯甲醇活化柱子，然后加1mL水调节，再加入样品上清液(B)或溶液(C)1mL，再加入甲醇∶水(体积比)＝80∶20的含2％氨水的溶液1mL作为淋洗液，再加入甲醇∶水(体积比)＝40∶60的含2％醋酸的溶液1mL作为洗脱液，收集洗脱液(D)和(E)待测；(5)、流动相的配制：将甲醇和水按体积比为甲醇∶水＝50∶50进行混合，其中水溶液和甲醇分别用三氟乙酸(TFA)调节至pH为2.11±0.05，然后脱气，过滤后配制成流动相；(6)、样品分析：Agilent1100液相色谱仪，配二极管阵列DAD检测器、色谱数据工作站(A.09.01版)、HT-130型柱温箱和TC-100柱温控制器，DIAMONSIL(TM)ODS C18分析色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)和C18保护预柱，流动相按(5)方法配制，流动相流速1mL/min，等度洗脱，检测波长为238nm，进样量100uL，色谱柱柱温控制在30℃；自动进样器进样(D)和(E)液相色谱检测分析，色谱数据工作站计算结果。