发明名称 快速监定念珠菌属酵母菌之乳胶制剂及其监定方法
摘要 本发明系提供一种快速监定念珠菌属酵母菌之乳胶制剂及其监定方法,系利用乳胶凝聚试验(latexagglutination test),以快速监定念珠菌属(Candida)酵母菌的方法;监定方法包括如下步骤:(1)以4莫耳浓度之尿素萃取白色念珠菌(Candida albicans C1-175)之表面蛋白质(surface proteins);(2)由表面蛋白质中以制备性硫酸十二脂酸钠-聚丙烯醯胺胶体电泳(preparative sodium dodecylsulfate gel electrophoresis)纯化出其中分子量介于125,000~145,000之蛋白质;(3)以此分子量介于125,000~145,000之蛋白质免疫白兔以产生抗血清;(4)把经亲和层析纯化(affinity-purified)之抗体被覆(coating)在乳胶(latex)颗粒上,做成乳胶试剂;(5)以此乳胶试剂和待测酵母菌菌株进行凝聚反应,以监定菌株是否为念珠菌属(产生凝聚反应)非念珠菌属酵母菌(不产生凝聚反应)。
申请公布号 TWI223667 申请公布日期 2004.11.11
申请号 TW088116465 申请日期 1999.09.21
申请人 国立成功大学 发明人 张长泉;张宪彰;薛博仁;黄爱惠;潘永历;黄雅惠
分类号 C12Q1/04;G01N33/53 主分类号 C12Q1/04
代理机构 代理人 陈长文 台北市松山区敦化北路二○一号七楼
主权项 1.一种快速监定念珠菌属酵母菌之方法,包括如下 步骤: (1)提供分子量介于125,000~145,000 Da之白色念珠菌( Candida albicans)细胞壁蛋白质; (2)将此蛋白质注射入动物体内以产生抗体; (3)以此抗体为工具来监定(检测)念珠菌。 2.如申请专利范围第1项所述「快速监定念珠菌属 酵母菌之方法」,其中所指监定方法包含任何凝聚 试验法(agglutination test)之免疫分析法。 3.如申请专利范围第2项所述「快速监定念珠菌属 酵母菌之方法」,其中所指免疫分析法是指酵素连 结免疫吸附分析法(enzyme linked immunosorbent assay)。 4.如申请专利范围第1项所述「快速监定念珠菌属 酵母菌之方法」,其中所指抗体包括多株(polyclonal) 和单株(monoclonal)抗体。 5.如申请专利范围第2项所述「快速监定念珠菌属 酵母菌之方法」,其中,凝聚试验法是指乳胶凝聚 试验法(latex agglutination test)。 6.一种快速监定念珠菌属酵母菌之制剂,其包括针 对分子量介于125,000 ~ 145,000 Da之白色念珠菌细胞 壁蛋白质之抗体。 7.如申请专利范围第6项之制剂,其中该制剂系用于 包含任何凝聚试验法之免疫分析法。 8.如申请专利范围第7项之制剂,其中所指免疫分析 法是指酵素连结免疫吸附分析法。 9.如申请专利范围第6项之制剂,其中该抗体包括多 株和单株抗体。 10.如申请专利范围第6项之制剂,其另包含乳胶试 剂。 11.一种快速监定念珠菌属酵母菌之方法,包括如下 步骤: (1)提供针对分子量介于125,000 ~ 145,000 Da之白色念 珠菌细胞壁蛋白质之抗体; (2)以此抗体对一待测菌体进行免疫分析,如可产生 免疫反应,则该待测菌体被监定为念珠菌属酵母菌 。 12.如申请专利范围第11项之方法,其中免疫分析包 含凝聚试验法。 13.如申请专利范围第11项之方法,其中免疫分析法 为酵素连结免疫吸附分析法。 14.如申请专利范围第11项之方法,其中抗体包括多 株和单株抗体。 15.如申请专利范围第12项之方法,其中凝聚试验法 为乳胶凝聚试验法。 图式简单说明: 图1为以4莫耳浓度尿素所萃取之菌体表面蛋白质, 经硫酸十二脂酸钠-聚丙烯醯胺胶体电泳分析及西 方免疫转渍后之结果照片;第1行:标准分子量蛋白 质,分别为94,000、67,000、20,100;第2行:标准分子量蛋 白质,分别为212,000、170,000、116,000、76,000、53,000; 第3行:白色念珠菌(CI-175),经同条件电泳后表面蛋 白质与稀释过之抗血清反应,再与稀释过之二次抗 体(结合山葵过氧化酵素之山羊抗免子免疫球蛋白 G)反应后,呈色所得之条纹(band),该条纹之相对移动 値(Rf)约0.114。
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