为建立人类胚胎干细胞(hESC)系进行的内细胞团分离

摘要

本发明涉及一种分离内细胞团的方法，步骤包括：将含有透明带、滋养外胚层和内细胞团的胚泡阶段的胚胎固定，用激光消融在胚泡阶段的胚胎上打孔，然后通过该孔从胚泡阶段的胚胎中取出内细胞团。激光消融技术是通过非－接触式二极管实现的。从胚泡阶段的胚胎中分离出的内细胞团用来构建人胚胎干细胞系。

主权项

1.一种采用非-接触式二极管激光技术，分离内细胞团(ICM)从而建立人类胚胎干细胞(hESC)系的方法，包括以下步骤：(i)将35mm培养皿中的胚泡置入被矿物油覆盖的50微升常规的胚胎活检培养液中；(ii)安装微操作系统，该微操作系统由带有加热台的显微镜，夹持固定吸液管的工具夹，抽吸吸液管和空气注射器组成；(iii)放置上述(i)中的培养皿，将胚泡装载于上述(ii)中的加热台上，并调节胚泡，使其位于视野的中央；(iv)通过空气注射器进行抽气，用固定吸液管固定胚泡，使其位于9点钟的位置，使被分离的内细胞团(ICM)位于3点钟的位置。