发明名称 |
一种生产猪瘟疫苗用抗原蛋白的方法 |
摘要 |
本发明提供一种生产猪瘟疫苗用抗原蛋白的方法,具体步骤包括:从猪瘟毒株提取病毒RNA,经反转录获得猪瘟病毒免疫基因E2;以E2基因为模板,进行聚合酶链反应,同时,根据毕赤酵母对密码子的偏爱性对E2基因进行密码子优化,然后通过酶切位点插入到毕赤酵母表达载体;将重组表达载体导入毕赤酵母菌,筛选出重组毕赤酵母菌;鉴定重组酵母菌的表达产物,并检测表达产物的免疫活性,确定入选的重组酵母菌;对选好的重组酵母菌的培养条件进行试验分析,选择出优化培养条件;在优化培养条件下培养重组酵母菌,生产疫苗用抗原蛋白。 |
申请公布号 |
CN1539989A |
申请公布日期 |
2004.10.27 |
申请号 |
CN200310103408.3 |
申请日期 |
2003.10.31 |
申请人 |
中国农业科学院兰州兽医研究所 |
发明人 |
刘湘涛;韩雪清;谢庆阁;尚佑军 |
分类号 |
C12P21/00;C12P19/34;C12N15/31;C12N15/81;C12N1/21 |
主分类号 |
C12P21/00 |
代理机构 |
北京亚沛专利事务所 |
代理人 |
王亚轩 |
主权项 |
1、一种生产猪瘟疫苗抗原蛋白的方法,具体步骤包括:从猪瘟毒株提取病毒RNA,经反转录获得猪瘟病毒免疫基因E2;以E2基因为模板,进行聚合酶链反应,同时,根据毕赤酵母对密码子的偏爱性对E2基因进行密码子优化,然后通过酶切位点插入到毕赤酵母表达载体;将重组表达载体导入毕赤酵母菌,筛选出重组毕赤酵母菌;鉴定重组酵母菌的表达产物,并检测表达产物的免疫活性,确定入选的重组酵母菌;对选好的重组酵母菌的培养条件进行试验分析,选择出优化培养条件;在优化培养条件下培养重组酵母菌,生产疫苗用抗原蛋白。 |
地址 |
730046甘肃省兰州市徐家坪11号 |