发明名称 一种生产猪瘟疫苗用抗原蛋白的方法
摘要 本发明提供一种生产猪瘟疫苗用抗原蛋白的方法,具体步骤包括:从猪瘟毒株提取病毒RNA,经反转录获得猪瘟病毒免疫基因E2;以E2基因为模板,进行聚合酶链反应,同时,根据毕赤酵母对密码子的偏爱性对E2基因进行密码子优化,然后通过酶切位点插入到毕赤酵母表达载体;将重组表达载体导入毕赤酵母菌,筛选出重组毕赤酵母菌;鉴定重组酵母菌的表达产物,并检测表达产物的免疫活性,确定入选的重组酵母菌;对选好的重组酵母菌的培养条件进行试验分析,选择出优化培养条件;在优化培养条件下培养重组酵母菌,生产疫苗用抗原蛋白。
申请公布号 CN1539989A 申请公布日期 2004.10.27
申请号 CN200310103408.3 申请日期 2003.10.31
申请人 中国农业科学院兰州兽医研究所 发明人 刘湘涛;韩雪清;谢庆阁;尚佑军
分类号 C12P21/00;C12P19/34;C12N15/31;C12N15/81;C12N1/21 主分类号 C12P21/00
代理机构 北京亚沛专利事务所 代理人 王亚轩
主权项 1、一种生产猪瘟疫苗抗原蛋白的方法,具体步骤包括:从猪瘟毒株提取病毒RNA,经反转录获得猪瘟病毒免疫基因E2;以E2基因为模板,进行聚合酶链反应,同时,根据毕赤酵母对密码子的偏爱性对E2基因进行密码子优化,然后通过酶切位点插入到毕赤酵母表达载体;将重组表达载体导入毕赤酵母菌,筛选出重组毕赤酵母菌;鉴定重组酵母菌的表达产物,并检测表达产物的免疫活性,确定入选的重组酵母菌;对选好的重组酵母菌的培养条件进行试验分析,选择出优化培养条件;在优化培养条件下培养重组酵母菌,生产疫苗用抗原蛋白。
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