具有绿色荧光蛋白示踪和抗性筛选标记的RNAi载体pGO

摘要

本发明涉及医药分子生物学技术领域，是一种可用于特异性抑制靶基因表达的具有绿色荧光蛋白示踪和真核细胞抗性筛选标记的RNA干扰(RNAi)载体pGO。本发明RNAi载体pGO是对pEGFP－C2载体的改造，去除了其原有的多克隆位点，在SV40 polyA和fl原核复制起点之间插入带有相应多克隆位点的U6启动子构成。只要在U6启动子下游的多克隆位点中的适当位点插入针对靶基因的siRNA模板，转染细胞后就可特异并有效地抑制该基因的表达。因而本发明的RNAi载体pGO可用于制备研究基因功能的试剂或用于抗肿瘤药物的研究和开发。

主权项

1、一种RNAi载体pGO，包括pUC复制起点pUC ori、fl复制起点fl ori、细菌启动子P、卡那霉素基因Kan、HSV-TK PolyA、U6启动子U6 promoter和多克隆位点MCS，其特征在于还含有用于表达绿色荧光蛋白基因的转录元件，包括CMV启动子CMV promoter、增强绿色荧光蛋白基因EGFP和SV40 PolyA，以及用于表达真核细胞抗性筛选标志的新霉素基因转录元件，包括SV40早期启动子SV40epromoter和新霉素抗性基因Neo。