一种基因组DNA为模板的PCR方法及其反应液

摘要

本发明提供一种用限制性核酸内切酶水解的基因组DNA作模板的PCR方法及其反应液，以克服标准PCR方法在扩增目标基因产物的同时往往伴随形成非专一产物、抑制目标产物形成的缺陷。通过选择对目标扩增顺序无切点的1－5种内切酶，特别是识别4－6碱基序列的酶对模板DNA进行酶切，然后直接接续PCR的方法，即可避免在PCR后用电泳分离或探针杂交等方法来鉴别和检测产物的过程中引入不确定的误差因素。利用PCR仪完成反应，步骤简便易于控制，检测专一性大大提高，适用于核酸样品的快速分析和微量病原体检测。

主权项

1.一种以基因组DNA为模板的聚合酶链式反应方法，依次包括如下步骤：(1)选择对目标扩增顺序无切点的限制性内切酶对基因组DNA进行酶切；(2)模板变性；(3)引物退火；(4)DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链；(5)按步骤(2)-(4)循环进行扩增反应。