主权项 |
1、一种有毒甲藻(Amphidinium klebsii)的纯种分离与大规模培养的方法,其特征在于:A,藻种纯系的分离:1),在热带珊瑚礁水域采集大型海藻,洗出附生物,收集上清部分,即得含(Amphidinium klebsii)藻细胞的水样;2),分离的藻细胞,在培养液中建立藻株;3),在实验室反复多次分离、驯化培养,重复步骤2),分离纯化后得到(Amphidinium klebsii)的纯系;B,大规模培养方法:1),原藻液2000ml,密度约200000cells/m1,在K培养液中平均生长约一周左右按1∶3比例扩种,先在体积为5升的三角烧瓶中进行扩种培养,大约五至七天后按1∶3扩种移至体积约20升的圆柱形玻璃缸中,继续分级扩种至体积分别为150升、250升和5000升内贴瓷砖的水池中进行大规模培养;2),当扩种的藻液由淡黄色,最终转变为褐色乃至深褐色,此时分别用筛绢或滤纸或加用沉淀剂使藻细胞大量沉淀,收集沉淀并用400目的筛绢过滤藻液收集藻体,具体收集步骤如下:(1)在藻液中加入浓度为0.20~0.35‰的KAl(SO4)2·12H2O后搅拌;(2)用胶管抽去上清水体,收集沉淀于器皿中并逐级浓缩;(3)把沉淀的倒入分液漏斗中静置;(4)放出分液漏斗中的下层沉淀至孔径为400目的滤膜上,滤去多余的水分;(5)用药勺刮取筛绢上的藻膏至收集瓶中放置冰箱中冻存。 |