إنتاج وتنقية الليمفوكين lymphokine

摘要

الملخص: يتعلق هذا الاختراع بطريقة لإنتاج وعزل الحامل الوراثي المتحول transformation المحتوي على عامل تشيط مستمرة البروتين CSF/cDNA ( CSF ) colony stimulating factor . الطريقة تشتمل على إعداد RNA من خلية تنتج CSF ، وإعداد RNA polyadenylated messenger من RNAالمذكور، وإعداد شريط stranded أحادي cDNA من messenger RNA المذكور ، وتحويل الشريط الأحادي cDNA إلى شريط ثنائي cDNA ، إضافة الشريط الثنائي cDNA للناقل المتحول والبكتيريا المتحولة transforming bacteria مع الناقل المذكور لانتاج مستعمرات colonies ، واختيار بقع pools لها مستعمرات من 200 إلى 500 لكل واحدة وعزل plasmid DNA من كل بقعة ، تحويل plasmid DNA إلى خلايا مستضيفة host مناسبة لتسريع بروتين CSF ، زرع الخلايا المتحولة وعمل اختبار المحلول الطافي supernatant لقياس نشاط CSF ، واختيار بقعة ايجابية من CSF وحجب المستعمرات المستخدمة لانتاج البقع لاختيار المستعمرة المحتوية على نشاط CSF.كذلك فإن الموصوف هو شفرة coding cDNA لبروتين له نشاط CSF ( أي CSF/cDNA ) ، وكائن حي مجهري a microorganism او خيط خلية محولة cell line transformed مع مجموعة ناقلة recombinant vector يحتوي CSF/cDNA ، وطريقة لانتاج بروتين CSF بالتعبير cSF/cDNA المذكور بواسطة عمل استزراع culturing للكائن المجهري microorganism او الخلية. الاختراع يقدم ايضا طريقة لتنقية بروتين CSF البروتين المنقى كذلك.