脱氧核糖核酸电化学纳米传感器的制备方法

摘要

本发明属于脱氧核糖核酸电化学纳米传感器的制备方法。将金纳米晶固定在金电极表面后，利用金纳米晶可以与带有巯基功能团的DNA相互作用的特性将已知序列的目标单链DNA(ssDNA)固定在金电极表面。采用银纳米晶标记的互补DNA与固定在金电极表面的目标ssDNA发生杂交反应。在酸性介质中将银纳米晶氧化释放以离子状态存在于溶液中。通过电化学方法检测银离子的量从而检测目标DNA的量。这种新型的DNA电化学传感器具有很强的选择性和很高的灵敏度。

主权项

1.一种脱氧核糖核酸电化学纳米传感器的制备方法，制备步骤如下：一金纳米晶在金电极表面的固定：1).处理好清洁的金电极浸入含有巯基化合物的溶液中，在室温下浸泡1～10个小时，取出后清洗，将物理吸附在电极表面的巯基化合物清洗干净，最后用大量高纯水清洗干净并用高纯氮气吹干；2).将电极放入pH值为3～7的金纳米晶溶液中，在暗处组装1～20个小时，取出后用高纯水清洗干净；二目标脱氧核糖核酸在金纳米晶修饰电极上的固定：将修饰了金纳米晶的电极放入含有目标脱氧核糖核酸缓冲溶液中，pH范围为5～9，在10℃～50℃下，相互作用时间0.5～5小时；三杂交：将修饰了目标脱氧核糖核酸的金电极放入含有银纳米晶标记的互补脱氧核糖核酸溶液中，温度选择为10℃～40℃，并不时地摇动，0.5～2小时后取出，用大量pH为7.0的磷酸缓冲溶液冲洗，确保银标记的脱氧核糖核酸与目标脱氧核糖核酸充分杂交后组装在电极表面；四检测：将电极放入200μL 50％HNO3，停留5分钟，以保证银可以完全溶解，最后放入400μL 1×10-4～5×10-1M KBr和200μL 0.1MKNO3，在酸性条件下，经过氧化处理使标记在互补脱氧核糖核酸上的银纳米晶以银离子的状态溶出，这样就可以通过电化学的方法检测银的量从而检测目标脱氧核糖核酸的量。