人体心肌肌钙蛋白Ⅰ的快速测定的方法

摘要

本发明公开了人体心肌肌钙蛋白I的纯化和其单克隆抗体的制备方法以及一步法测定其含量的方法。其特点是采用亲和层析法纯化人体心肌肌钙蛋白I，利用该纯化的心肌肌钙蛋白I与BALB/c小鼠免疫制备该心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体，并建立了一步法测定心肌肌钙蛋白I含量的方法。其优点是所得抗体的同源性好，特异性和敏感性高。其检测方法操作简单，成本低。可广泛用于心脏病的检查。

主权项

1、人体心肌肌钙蛋白I的快速测定的方法，其特征在于包含如下步骤：(1)用50～150mmoL/L，pH值为9.4～9.6的碳酸氢盐缓冲液、链亲和素包被96孔聚苯乙烯酶联板；(2)取待测样品和标准品，分别与联有生物素的抗心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体和联有辣根过氧化物酶的抗心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体相接触后，分别加入上述酶联板包被孔中；(3)将步骤(2)之酶联板进行孵育；(4)取孵育后的酶联板，在其包被孔中分别加入底物过氧化氢与2，2’-连氧-双-3-乙基苯噻唑林-6-磺酸盐进行酶促显色；(5)读取上述步骤(4)酶促显色后波长405nm时的吸光度，将待测样品与标准品进行对照，计算出待测样品中的心肌肌钙蛋白I的含量。