延胡索酸酶转化底物生产L－苹果酸的技术

摘要

本发明涉及利用延胡索酸酶转化底物生产L－苹果酸(下称LMA)的技术。本发明将延胡索酸溶于浓度为40－60％NH₄OH溶液中，制备成延胡索酸铵溶液(底物)。将温特曲霉接入培养基后，进行培养、繁殖，发酵合成延胡索酸酶。当发酵液菌体酶活达到120－200u/100ml时，将发酵液与底物——延胡索酸铵溶液按1∶0.5－1.2混合搅拌，调节pH7.2－8.0之间，控制搅拌转速60r/min，保持温度30℃，经20h转化即完成LMA的合成。本发明将菌体生长、产酶与转化分开进行，克服一步发酵和混合发酵中菌体和底物同时在培养液中进行发酵所带来的无法克服的缺点：即无法控制各阶段生物学过程中所需的最佳条件。操作简便，耗能少，产酶量由旧工艺10％增加到20－32％，发酵总周期由原来的90h缩短至35h以内，转化时间仅20h。

主权项

1、一种利用延胡索酸酶转化底物生产L-苹果酸的技术，其特征在于首先将延胡索酸溶于NH4OH溶液中制备成延胡索酸盐溶液，按1∶0.5-1.2的比例直接与含有足够延胡索酸酶的发酵液混合转化，制备L-苹果酸。