一种免疫防龋DNA疫苗及制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种免疫防龋DNA疫苗及制备方法和应用，大肠杆菌(Escherichia coli)CCTCC NO：M201041。采用PCR技术从携带有PAc编码基因pac的质粒pPC41扩增出重要抗原决定簇区A区和P区片段，并克隆到pGEM^-T载体中，将筛选后的阳性重组质粒与真核表达质粒pCI定向克隆成防龋DNA疫苗pCIA-P，并经DNA序列分析鉴定证实构建的正确性，动物实验证明可有效防龋。本发明方法简单，生产成本低廉，安全性高，免疫应答持久，该疫苗在鼻粘膜、胃肠道粘膜中的应用，还可用于龋病易感人群的龋病防治。

主权项

1、一种免疫防龋DNA疫苗，其特征在于大肠杆菌Escherichia coli CCTCCNO：M201041，携带质粒pCIA-P，DNA序列为： TCAATATTGGCCATTAGCCATATTATTCATTGGTTATATAGCATAAATCAATATTGGCTATTGGCCATTGCATACGTTGTATCTATATCATAATATGTACATTTATATTGGCTCATGTCCAATATGACCGCCATGTTGGCATTGATTATTGACTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTCCGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTACGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACACCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAATAACCCCGCCCCGTTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTCGTTTAGTGAACCGTCAGATCACTAGAAGCTTTATTGCGGTAGTTTATCACAGTTAAATTGCTAACGCAGTCAGTGCTTCTGACACAACAGTCTCGAACTTAAGCTGCAGAAGTTGGTCGTGAGGCACTGGGCAGGTAAGTATCAAGGTTACAAGACAGGTTTAAGGAGACCAATAGAAACTGGGCTTGTCGAGACAGAGAAGACTCTTGCGTTTCTGATAGGCACCTATTGGTCTTACTGACATCCACTTTGCCTTTCTCTCCACAGGTGTCCACTCCCAGTTCAATTACAGCTCTTAAGGCTAGAGTACTTAATACGACTCACTATAGGCTAGCCTCGAGAAATGGCTGCCAATCAAGCAGCCTATCAAAAAGCCCTTGCTGCTTATCAGGCTGAACTGAAACGTGTTCAGGAAGCTAATGCAGCCGCCAAAGCCGCTTATGATACTGCTGTAGCAGCAAATAATGCCAAAAATACAGAAATTGCCGCTGCCAATGAAGAAATTAGAAAACGCAATGCAACGGCCAAAGCTGAATATGAGACTAAGTTAGCTCAATATCAAGCTGAACTAAAGCGTGTTCAGGAAGCTAATGCCGCAAACGAAGCAGACTATCAAGCTAAATTGACCGCCTATCAAACAGAGCTTGCTCGTGTTCAAAAAGCCAATGCGGATGCTAAAGCGACCTATGAAGCAGCTGTAGCAGCAAATAATGCCAAAAATGCGGCACTCACAGCTGAAAATACTGCAATTAAGCAACGCAATGAGAATGCTAAGGCGACTTATGAAGCTGCACTCAAGCAATATGAGGCCGATTTGGCAGCGGTGAAAAAAGCTAATGCCGCAAACGAAGCAGACTATCAAGCTAAATTGACCGCCTATCAAACAGAGCTCGCTCGCGTTCAAAAAGCCAATGCGGATGCTAAAGCGGCCTATGAAGCAGCTGTAGCAGCAAATAATGCCGCAAATGCAGCGCTCACAGCTGAAAATACTGCAATTAAGAAGCGCAATGCGGATGCTAAAGCTGATTACGAAGCAAAACTTGCTAAGTATCAAGCAGATCTTGCCAAATATCAAAAAGATTTAGCAGACTATCCAGTTAAGTTAAAGGCATACGAAGATGAACAAACTTCTATTAAAGCTGCACTGGCAGAACTTGAAAAACATAAAAATGAAGACGGAAACTTAACAGAACCATCTGCTCAAAATTTGGTCTATGATCTTGAGCCAAATGCGAACTTATCTTTGACAACAGATGGGAAGTTCCTTAAGGCTTCTGCTGTGGATGATGCTTTTAGCAAAAGCACTTCAAAAGCAAAATATGACCAAAAAATTCTTCAATTAGATGATCTAGATATCACTAACTTAGAACAATCTAATGATGTTGCTTCTTCTATGGAGCTTTATGGGAATTTTGGTGATAAAGCTGGCTGGTCAACGACAGTAAGCAATAACTCACAGGTTAAATGGGGATCGGTACTTTTAGAGCGCGGTCAAAGCGCAACAGCTACATACACTAACCTGCAGAATTCTTATTACAATGGTAAAAAGATTTCTAAAATTGTCTACAAGTATACAGTGGACCCTAAGTCCAAGTTTCAAGGTCAAAAGGTTTGGTTAGGTATTTTTACCGATCCAACTTTAGGTGTTTTTGCTTCTGCTTATACAGGTCAAGTTGAAAAAAACACTTCTATTTTTATTAAAAATGAATTCACTTTCTATGACGAAGATGGAAAACCAATTAATTTTGATAATGCCCTTCTCTCAGTAGCTTCTCTTAACCGTGAACATAACTCTATTGAGATGGCTAAAGATTATAGTGGTAAATTTGTCAAAATCTCTGGTTCATCTATTGGTGAAAAGAATGGCATGATTTATGCTACAGATACTCTTAACTTTAAACAGGGTGAAGGTGGCTCTCGCTGGACTATGTATAAAAATAGTCAAGCTGGTTCAGGATGGGATAGTTCAGATGCGCCGAATTCTTGGTATGGAGCAGGGGCTATTAAAATGTCTGGTCCGAATAACCATGTTACTGTAGGAGCAACTTCTGCAACAAATGTAATGCCAGTTTCTGACATGCCTGTTGTTCCTGGTAAGGACAATACTGATGGCAAAAAACCAAATATTTGGTATTCTTTAAATGGTAAAATCCGTGCGGTTAATGTTCCTAAAGTTACTAAGGAAAAACCCACACCTCCGGTTAAACCAACAGCTCCAACTAAACCAACTTATGAAACAGAAAAGCCATTAAAACCGGCACCAGTAGCTCCAAATTATGAAAAGGAGCCAACACCGCCGACAAGGACACCGGATCAAGCAGAGCCAAACAAACCCACACCGCCGACCTATGAAACAGAAAAGCCGTTGGAGCCAGCACCTGTTGAGCCAAGCTATGAAGCAGAGCCAACACCGCCGACAAGGACACCGGATCAGGCAGAGCCAAATAAACCCACACCGCCGACCTATGAAACAGAAAAGCCGTTGGAGCCAGCACCTGTTGAGCCAAGCTATGAAGCAGAGCCAACGCCACCGACACCAACACCAGATCAACCAGAACCAAACAAACCTGTTGAGCCAACTTATGAGTAAGTCGACCCCGGGCGGCCGCTTCGAGCAGACATGATAAGATACATTGATGAGTTTGGACAAACCACAACTAGAATGCAGTGAAAAAAATGCTTTATTTGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAACCATTATAAGCTGCAATAAACAAGTTAACAACAACAATTGCATTCATTTTATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGATGTGGGAGGTTTTTTAAAGCAAGTAAAACCTCTACAAATGTGGTAAAATCGATAAGGATCCGGGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGAGCTTTACGGCACCTCGACCGCAAAAAACTTGATTTGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAATATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGTTTACAATTTCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGAGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACAT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