发明名称 突变的羟苯基丙酮酸盐二加氧、含此基因且耐受除草剂之DNA序列及植物的分离法
摘要 本发明系关于编码突变的羟苯基丙酮酸盐二加氧(HPPD)之核酸序列,其对HPPD抑制剂具有改良的耐受性,并有关包含该序列作为编码序列之嵌合基因,及其在分离对某些除草剂具有抗性之植物上的用途。
申请公布号 TW591108 申请公布日期 2004.06.11
申请号 TW087118646 申请日期 1998.11.07
申请人 隆宝兰农业有限公司 发明人 菲利浦道德克;海伦波顿;佛罗伦斯度曼斯;麦索罗卓斯;阿兰赛蓝登
分类号 C12N15/53;A01H5/00 主分类号 C12N15/53
代理机构 代理人 陈长文 台北市松山区敦化北路二○一号七楼
主权项 1.一种功能性突变羟苯基丙酮酸盐二加氧(HPPD), 其对HPPD抑制剂较不敏感,其特征在于其C-末端部份 含有一或二处突变,其中,就假单胞菌HPPD序列而言, 该突变胺基酸系选自下列胺基酸:Pro215.Gly298.Phe333. Gly334和Gly336。2.一种突变羟苯基丙酮酸盐二加氧 (HPPD),其对HPPD抑制剂较不敏感,其特征在于在其C -末端部份含有下列的序列: -Phe-Xaa-Glu-Xab-Asn-Phe- 其中Xaa和Xab分别代表甘胺酸(Gly)或位阻大于甘胺 酸的胺基酸,咸了解,如果Xaa或Xab代表Gly时,另一个 胺基酸则与Gly不同。3.根据申请专利范围第2项之 突变的HPPD,其特征在于Xaa和Xab中至少有一个代表 Leu、Glu、Trp或Ile。4.根据申请专利范围第3项之突 变的HPPD,其特征在于Xab代表Glu、Trp或Ile。5.根据申 请专利范围第4项之突变的HPPD,其特征在于Xab代表 Trp。6.根据申请专利范围第1项之突变的HPPD,其特 征在于就假单胞菌HPPD序列而言,该突变胺基酸系 选自下列胺基酸:Pro215和Gly336。7.根据申请专利范 围第6项之突变的HPPD,其特征在于其含有选自下列 的突变:Pro215Leu、Gly336Glu、Gly336Trp或Gly336Ile。8.一 种核酸序列,其编码根据申请专利范围第1至7项中 任一项之突变的HPPD。9.一种嵌合基因,其系由编码 序列和位于5'和3'位置之异源性调节要素所组成, 能够在宿主生物中发挥功能,特征在于该编码序列 含有至少一个根据申请专利范围第8项之核酸序列 。10.根据申请专利范围第9项之嵌合基因,其特征 在于该宿主生物系选自细菌,酵母菌,毕赤酵母( Pichia),真菌,杆状病毒,或植物细胞和植物。11.根据 申请专利范围第10项之嵌合基因,其中该细菌为大 肠杆菌(E. coli)。12.根据申请专利范围第10项之嵌 合基因,其中该酵母菌为酒酵母菌属(Saccharomyces)或 克鲁维尔酵母菌属(Kluyveromyces)。13.根据申请专利 范围第10项之嵌合基因,其中该真菌为麴菌属( Aspergillus)。14.根据申请专利范围第10项之嵌合基 因,其特征在于该宿主生物为植物细胞或植物。15. 根据申请专利范围第14项之嵌合基因,其特征在于 其含有编码突变HPPD之核酸序列之5'端,编码植物转 运的核酸序列,将该序列安置在启动基因区和编 码突变HPPD的序列之间,而得以容许其表现转运/ 突变的HPPD融合蛋白质。16.一种转运/突变HPPD融 合蛋白质,其中转运系指挥突变HPPD进入质体内 且该突变HPPD系如申请专利范围第1至7项中任一项 所定义者。图式简单说明: 图1表示已知之HPPD序列与假单胞菌HPPD序列之排列 。 图2表示假单胞菌HPPD单体之三级结构图示。 图3表示萤光假单胞菌A32 HPPD(seq-1)与集胞藻属PCC 6803 HPPD(seq-2)之排列。
地址 法国