对有机磷农药具有广谱降解能力的菌株及其筛选方法

摘要

本发明涉及对有机磷农药具有广谱降解能力的菌株的筛选方法，还涉及筛选出的菌株。将菌株分别接于LB完全培养基中活化，取活化好的菌离心收集菌体，用Burk培养基悬起菌体后，于加有甲基对硫磷0.5mg/ml的液体Burk无机盐培养基中培养；菌液稀释后涂布于加有0.2mg/mL敌敌畏和0.2mg/mL甲基对硫磷的Burk无机盐固体培养基上，于培养箱中培养，挑取单菌落；将分离的单菌落菌株分别接种于几种含有有机磷农药的Burk无机盐固体培养基平板上，观察消解圈；选择在几种农药平板上消解圈均较大的菌株。由于它分泌有机磷农药消解酶，且酶活性达到9.36u/mL培养液，因此为克隆有机磷农药消解酶基因提供很好的基因源，最终达到廉价生产有机磷农药消解酶的目的。

主权项

1、一种筛选对有机磷农药具有广谱降解能力的菌株的方法，其特征在于，其包括以下步骤：a)选取一定数量的菌株，将它们分别接于LB完全培养基中活化，取活化好的菌离心收集菌体，弃去培养基上清，用Burk培养基悬起菌体后，按1％接于50ml液体Burk无机盐培养基中，培养基中加有甲基对硫磷0.5mg/ml，在一定温度下震荡培养一定时间；b)菌液用无菌水梯度稀释后分别涂布于加有0.2mg/mL敌敌畏和0.2mg/mL甲基对硫磷的Burk无机盐固体培养基上，置于一定温度的培养箱中培养，挑取单菌落，经平板划线纯化；c)将分离到的单菌落菌株分别接种于几种含有有机磷农药的Burk无机盐固体培养基平板上，观察消解圈；d)选择在几种农药平板上消解圈均较大的菌株。