PCR方法

摘要

提供了平衡的增倍PCR方法的方法。在该方法中，当在第一和第二个扩增时期当引物的或选物限制地调节第一个引物套的第一个扩增子和第二个引物套的第二个扩增子生成的相对速度时，在单个试管中利用两个或多个成顺序的暂时PCR时期有效地分开两个或多个PCR反应。同时提供了在手术内诊断和预后中发现特殊用途的快速RT－PCR方法，例如通过确定在岗哨淋巴结中的瘤胚抗原(CEA)的表达水平，在诊断恶性食管腺癌中发现的。

主权项

1.一种多重PCR反应的方法，包括在PCR反应混合物中，在DNA样品上进行PCR扩增的步骤，潜在PCR扩增是在开始的扩增时期和第二个扩增时期进行的，各个扩增时期包括一个或多个PCR循环，各个PCR循环包括变性步骤，退火步骤和延长步骤，这些步骤可以在与退火步骤相同的温度下进行，其中第二个扩增时期的PCR扩增是在与第一个扩增时期不同的反应条件下进行的，可以调节第一个引物套的第一个扩增子和第二个引物套的第二个扩增子在第一个和第二个扩增时期的生产。