CONSTRUCCIONES DE CEBADOR PCR PARA SU UTILIZACION EN UN SISTEMA INTEGRADO DE SEÑALIZACION.

摘要

Procedimiento para la detección de un ácido nucleico objetivo, comprendiendo dicho procedimiento poner en contacto el ácido nucleico matriz de una muestra con (i) un sistema de señalización (ii) un cebador con ácido nucleico de cola que tiene una zona de unión a la plantilla y la cola que comprende un segmento de unión y una zona de unión al objetivo, en presencia de trifosfatos de nucleósido apropiados y un agente para su polimerización, en condiciones tales que la zona de unión a la plantilla del cebador se hibridará con una secuencia complementaria en el ácido nucleico matriz y se ampliará para formar un producto de ampliación del cebador, separando cualquiera de dichos productos de la matriz, tras lo cual la zona de unión al objetivo en la cola del cebador se hibridará con una secuencia en el producto de ampliación del cebador correspondiente con el ácido nucleico objetivo y en el que cualquier hibridación específica del objetivo produce un cambio detectable en el sistema de señalización, de modo que la presencia o ausencia del ácido nucleico objetivo en la muestra se detecta con relación a la presencia o ausencia de un cambio detectable en el sistema de señalización.