荧光共振能量转移类寡核苷酸基因芯片制备方法

摘要

本发明涉及一种荧光共振能量转移类寡核苷酸基因芯片制备方法，采用将寡核苷酸片段两端分别用不同的荧光基团进行标记，中间用生物素标记的方法，将标记的寡核苷酸片段以微点阵列的形式固定于链亲和素包被的玻片表面，从而制备荧光共振能量转移类基因芯片。本发明制备的基因芯片可用于检测待测核酸的种类与含量，单核苷酸多态性分析以及疾病诊断等领域，待测样品无需预先用荧光标记，由于探针分子没有茎环结构，因此与目标核酸杂交时没有能量障碍，检测的灵敏度高，目标分子可以是DNA、RNA、单链核酸、双链核酸，因此可以提高检测通量。

主权项

1、一种荧光共振能量转移类寡核苷酸基因芯片制备方法，其特征在于将寡核苷酸片段两端预先用相应的荧光基团标记，一个是荧光供体基团，另一个是荧光受体基团，片段的中间用生物素标记，荧光标记的寡核苷酸片段以微点阵的形式固定于链亲和素包被的玻片表面，具体步骤如下：第一步，将链亲和素固定于玻片表面；第二步，化学合成寡核苷酸片段，这种片段的序列特征是5’-末端的序列将与目标区域的3’-序列配对，3’-末端的序列将与目标区域的5’-序列配对，中间序列是寡聚胸腺核苷酸，这种片段的修饰特征是两个末端分别用荧光供体基团和荧光受体基团修饰，中间用生物素修饰，寡核苷酸片断中间的生物素基团用于寡核苷酸片段在链亲和素包被玻片表面的固定；第三步，修饰过的寡核苷酸片段微点阵化固定于用链亲和素包被的玻片表面，制备荧光共振能量转移类寡核苷酸基因芯片。