发明名称 重组人IA-2抗原的制备方法
摘要 重组人IA-2抗原的制备方法,包括从胎脑中克隆人IA-2胞内结构域(包括氨基酸606~979)的编码基因;以嵌套式PCR扩增该编码基因,实现PinpointXa-IA-2表达型重组质粒的构建;将含重组质粒的JM109菌经IPTG诱导培养,得到IA-2重组蛋白;IA-2重组蛋白经分离、亲和层析和透析纯化,获得生物素酰化IA-2融合蛋白,可以直接作为抗原,用于IA-2抗体的链亲和素固相酶免检测技术。
申请公布号 CN1490332A 申请公布日期 2004.04.21
申请号 CN03141675.6 申请日期 2003.07.17
申请人 上海市内分泌代谢病研究所 发明人 罗敏
分类号 C07K14/435;C12N15/12;C12P19/34;C12P21/00 主分类号 C07K14/435
代理机构 上海东方易知识产权事务所 代理人 许瑞德
主权项 1、重组人IA-2抗原的制备方法,包括步骤1:IA-2表达型重组质粒的构建;步骤2:IA-2重组蛋白的诱导表达;步骤3:IA-2重组蛋白的分离、亲和层析和透析纯化;其特征在于:所述的步骤1是从胎脑中克隆人IA-2胞内结构域(包括氨基酸606~979)的编码基因;以嵌套式PCR扩增该编码基因,实现Pinpoint Xa-IA-2表达型重组质粒的构建;所述的步骤2是将含重组质粒的JM109菌经IPTG诱导培养,得到IA-2重组蛋白;所述的步骤3是将IA-2重组蛋白经分离、亲和层析和透析纯化,获得生物素酰化IA-2融合蛋白。
地址 200025上海市瑞金二路197号