发明名称 |
重组人IA-2抗原的制备方法 |
摘要 |
重组人IA-2抗原的制备方法,包括从胎脑中克隆人IA-2胞内结构域(包括氨基酸606~979)的编码基因;以嵌套式PCR扩增该编码基因,实现PinpointXa-IA-2表达型重组质粒的构建;将含重组质粒的JM109菌经IPTG诱导培养,得到IA-2重组蛋白;IA-2重组蛋白经分离、亲和层析和透析纯化,获得生物素酰化IA-2融合蛋白,可以直接作为抗原,用于IA-2抗体的链亲和素固相酶免检测技术。 |
申请公布号 |
CN1490332A |
申请公布日期 |
2004.04.21 |
申请号 |
CN03141675.6 |
申请日期 |
2003.07.17 |
申请人 |
上海市内分泌代谢病研究所 |
发明人 |
罗敏 |
分类号 |
C07K14/435;C12N15/12;C12P19/34;C12P21/00 |
主分类号 |
C07K14/435 |
代理机构 |
上海东方易知识产权事务所 |
代理人 |
许瑞德 |
主权项 |
1、重组人IA-2抗原的制备方法,包括步骤1:IA-2表达型重组质粒的构建;步骤2:IA-2重组蛋白的诱导表达;步骤3:IA-2重组蛋白的分离、亲和层析和透析纯化;其特征在于:所述的步骤1是从胎脑中克隆人IA-2胞内结构域(包括氨基酸606~979)的编码基因;以嵌套式PCR扩增该编码基因,实现Pinpoint Xa-IA-2表达型重组质粒的构建;所述的步骤2是将含重组质粒的JM109菌经IPTG诱导培养,得到IA-2重组蛋白;所述的步骤3是将IA-2重组蛋白经分离、亲和层析和透析纯化,获得生物素酰化IA-2融合蛋白。 |
地址 |
200025上海市瑞金二路197号 |