具有C型类凝集素结构域的支架结构的蛋白质组合文库

摘要

本发明提供了一族含有CTLD(C型类凝集素结构域)的新颖的蛋白质文库，其中沿CTLD中的配基结合位点排列的内部多肽环区为完全或部分随机化的多肽区段所替代。选取四柄蛋白CTLD作为本发明优选实施方案的框架，并且本发明公开了在产生和操作人和鼠四柄蛋白CTLD文库中有用的多种噬菌粒载体。利用重组fd噬菌体展示载体，单体及三聚体形式的四柄蛋白CTLD有效展示为完全功能形式的基因III融合体。通过在每轮富集中对富集的亚群进行筛选或选择并随后进行扩增，这样通过进行一或多轮富集就可很容易的从展示已对环区进行了随机化的CTLD的载体文库中分离对新配基具有亲和性的CTLD衍生物。相对于重组抗体衍生物，有效生产含有具有新结合特性的CTLD的蛋白产物在简单性、生产成本和效率以及制备和诊断或治疗应用方面提供了重要的优势，所述蛋白产物可通过如细菌表达或以单体、三聚体或多聚体形式进行的体外重折叠来制备。

主权项

1.具有C型类凝集素结构域(CTLD)支架结构的蛋白质，该蛋白质包含有模型CTLD的变体，其中α-螺旋和β-链以及连接区段保守到CTLD的支架结构基本维持不变而仅仅通过氨基酸替代、缺失、插入或它们的结合来进行环区改变的程度，前提为该蛋白质不是说明书表2中所列的C型类凝集素蛋白或C型凝集素的任何已知的CTLD环衍生物。