黄金矿藏勘探的微生物检测方法

摘要

本发明公开了一种黄金矿藏勘探的微生物检测方法，该方法先将蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)孢子免疫注射家兔5次，制成第一抗体；用第一抗体免疫注射雄性山羊5次，制成第二抗体；然后将第二抗体作为检测黄金矿物样品的主要指示物，检测矿物样品是否含有黄金及含金的品位。可在野外同时对多份矿物样品进行定性、定量及快速、方便地检测，对人畜无害，且不污染环境。

主权项

1、黄金矿藏勘探微生物检测方法，其特征在于，该方法先将蜡状芽孢杆菌孢子免疫注射家兔5次，制成第一抗体；用第一抗体免疫注射雄性山羊5次，制成第二抗体；然后将第二抗体作为检测黄金矿物样品的指示物，检测矿物样品是否含有黄金及含金的品位；上述方法按下列步骤顺序进行：a、将蜡状芽孢杆菌孢子在肉汤培养基中培养96小时，离心、去上清，用生理盐水洗沉淀，去上清，如此反复2～3次，沉淀的蜡状芽孢杆菌孢子用超声波破碎器处理，用生理盐水稀释成40mg/ml，按1∶1加福氏完全佐剂；b、用上述物质免疫注射3～5斤的家兔，第一次用量0.5毫升/只，以后每隔三天注射，用量1毫升/只，5次后，从兔耳静脉抽血，检测抗体效价为1∶320～640时，取兔血，分离抗血清；c、用50％硫酸铵洗脱一次，取抗血清沉淀，加等量生理盐水，再加入200毫升饱和的硫酸铵，4℃下放置30分钟，离心、去上清；d、再用40％硫酸铵洗，用c的同样方法，将提取的球蛋白洗脱二次；e、加入30毫升盐水，再加入20毫升饱和硫酸铵至成40％饱和度，4℃放置30分钟，离心、去上清，此过程重复一次；f、将球蛋白装入处理过的透析袋中，放置盐水中透析，直到盐水用奈氏佐剂测不出NH4+为止，该球蛋白为第一抗体；g、从透析袋中取第一抗体按1∶1加入福氏完全佐剂免疫注射雄性山羊，第一次用量1毫升，每隔三天注射一次，每次用量1.5毫升/只，在第五次注射48小时后，从心脏取血检测抗体效价，当抗体效价为1∶320～640时，从山羊的颈动脉取血，4℃无菌保存8～12小时，离心、去沉淀；h、取200毫升上清液血清加等量生理盐水，再加入200毫升饱和的硫酸铵，4℃下放置30分钟，离心，去上清，取羊血清球蛋白加生理盐水，再加入200毫升饱和的硫酸铵，4℃下放置30分钟，离心、去上清，用40％硫酸铵洗脱二次；I、将提取的羊球蛋白加30毫升盐水，再加入20毫升饱和硫酸铵至成40％饱和度，在4℃放置30分钟，离心、去上清，此过程重复一次；j、将提取的羊球蛋白装入处理过的透析袋中，放置盐水中透析，使硫酸铵逐渐向膜处渗出，直到盐水用奈氏佐剂测不出NH4+为止；k、将透析过的羊球蛋白过柱层析，洗脱收集峰样；l、将收集的羊球蛋白装在透析袋中，用蒸馏水透析8～12小时，取出透析袋，在袋外加100％固体蔗糖，待蔗糖浸湿后去掉，再加100％固体蔗糖，反复4～10次，即为纯化的羊球蛋白，该羊球蛋白为第二抗体；m、用酶联免疫吸附法检测，用酶联检测仪在492nm波长测定各反应孔的光吸收密度，凡检测抗体的被检测样品吸光度/阴性对照样品吸光度的值小于1.5的为阴性，超过1.5的为阳性，如果检测结果是阳性的，证明样品含黄金，若前n个孔的结果为阳性，则黄金品位的数量级为10-3+n克金/吨样品。