杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生与植株再生方法

摘要

本发明涉及一种杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生与植株再生方法。鹅掌楸属种间杂交在生长、抗逆性和观赏性方面具有明显的优势。但鹅掌楸天然结实率低，有性繁殖能力差；扦插技术要求高，成活率也很低，不能满足生产应用的需要。本发明的特征是在鹅掌楸属杂交亲本选择和种间杂交育种的基础上，分别将正交、反交和回交制种所得数量有限的未成熟胚进行体细胞胚胎发生的诱导和培养，形成大量同步发育的体细胞胚，进而将体细胞胚培育成为完整的植株。利用本发明所提供的方法，可实现杂交鹅掌楸苗木的大规模、短周期、高繁殖率、低成本的工厂化生产和产业化开发。

主权项

1.一种杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生与植株再生的方法，其特征在于采集人工杂交授粉发育的杂交鹅掌楸聚合翅果，在无菌条件下，分离球形期至子叶期的未成熟合子胚进行体胚发生培养；体胚发生培养不同发育阶段所使用的培养基和附加激素配方为：a.胚性愈伤诱导阶段采用1/2MS基本培养基，附加浓度为0.5～5.0mg/L的2，4-D，0～0.5mg/L的6-苄胺基嘌呤，500～1000mg/L的天然复合物水解酪蛋白和1～5mg/L的维生素C；b.胚性愈伤组织的增殖阶段，使用1/2MS基本培养基，附加浓度为0～0.5mg/L的2，4-D，0～0.25mg/L的6-苄胺基嘌呤，500～1000mg/L的天然复合物水解酪蛋白和1～5mg/L的维生素C；c.胚性愈伤组织的状态调整阶段，采用MS基本培养基，蔗糖浓度控制 为50～60g/L，附加浓度为0～0.5mg/L的2，4-D，0～0.25mg/L的6-苄胺基嘌呤，500～1000mg/L的天然复合物水解酪蛋白和1～5mg/L的维生素C；d.胚状体的发生阶段，采用MS基本培养基，附加浓度为0.5～5.0mg/L的玉米素，0～1.0mg/L的吲哚乙酸；e.球形胚形成以后阶段，采用MS改良培养基；f.体胚植株再生阶段，采用White培养基。