| 主权项 |
1.一种筛选用以治疗衍脂蛋白C-III相关脂肪代谢失 常之物质的方法,该方法之特征为: -将该等测试物质与一种Rev-erb家族之受体及/或一 种Rev-erb受体之反应元件接触, -以任何适当之方法测量下列: -该物质与Rev-erb受体之结合,或由该物质与Rev-erb受 体所形成复合物与其反应元件之结合,及/或 -置于包含Rev-erb反应元件之启动子控制下之基因 转录活性之调控。2.根据申请专利范围第1项之方 法,其特征为该Rev-erb受体及Rev-erb受体反应元件系 hRev-erb 受体及hRev-erb 受体反应元件。3.一种 筛选用以治疗衍脂蛋白C-III相关脂肪代谢失常之 物质的方法,其包括一细胞株, -表现Rev-erb受体 -含有rev-erb启动子,其系控制Rev-erb受体或发光、 CAT、硷性磷酸或-半乳糖等报告者基因之 表现 -一调控Rev-erb受体或报告者基因之表现的测试化 合物,其系利用就地杂交、RT-PCR、北方墨渍法、点 墨渍法或报告者基因活性测试予以测定。4.根据 申请专利范围第1或3项之方法,其所选出物系用以 制备医药组合物,该组合物可以用来治疗人或动物 与衍脂蛋白质C-III有关之脂肪代谢失常。5.根据申 请专利范围第1或3项之方法,其系藉由使用Rev-erb受 体及/或其反应元件,以及其对衍C-III之作用来定性 ,评审以及宣告彼等具有抗动脉粥状硬化性质物质 之作用机制。图式简单说明: 图1 外源表现之hRev-erb 其apo C-III启动子控制之发光 报告基因活性之降低。 图2 apo C-III启动子控制发光报告基因活性之抑制与 hRev-erb 之表现呈相关性。 图3 外源表现之hRev-erb 之apo C-III启动子控制发光 报告基因活性之抑制不受hROR 1表现之影响。 图4 外源表现之hRev-erb 之apo C-III启动子控制发光 报告基因活性之抑制不受hHNF4表现之影响。 图5 渐被截短之apo C-III启动子减少发光报告基因之 活性。 图6 以发光报告基因活性测试apo C-III启动子中hRev- erb 反应元件之定位。 图7 apo C-III启动子hRev-erb 反应元件及hRev-erb 蛋白 之凝胶延滞实验。 图8 不同apo C-III启动子片段之外源表现之hRev-erb 抑 制apo C-III启动子调控发光报告基因之活性。 图9 外源表现之hRev-erb ,hRev-erb 或hRev-erb 抑制apo C-III启动子调控发光报告基因之活性。 图10A及10B 分别代表被破坏hRev-erb 之小鼠(-/-)增加三甘油 酯及apo C-III血浓度含量。 图10C 北方墨点(Northern Blot)显示被破坏hRev-erb 之小鼠( -/-)增加apo C-III基因表现。 图11 血清FPLC图谱显示在被破坏hRev-erb 之小鼠(-/-)之 VLDL溶离分中三甘油酯之增加。 图12 由发光报告基因试验使衍生自hRev-erb 启动子 之Rev-DR2反应元件特征化。 图13 外源性表现做为一嵌合型融合蛋白之Ga14 DNA结合 功能区域及hRev-erb 配位体结合功能区域之发光 报告基因试验。 |
