微生物同步发酵正十四烷生产十二烷1,12－二羧酸的方法

摘要

本发明公开了一种利用微生物同步发酵正十四烷(nC₁₄)高产十二烷1，1 2-二羧酸(DC₁₄)的方法。所用微生物为一株热带假丝酵母(Candida Tropicalis)优良生产突变株NP-6-5。其特点是：在微生物菌种接入含有C₁₁-C₁₈各种正烷烃为基质的培养基后，28小时内，pH控制在6.8以下以菌体生长为主，产生一定数量的二元酸；28-60小时，pH控制在7.5以下，以产酸为主，也增长一定数量菌体；60小时以后，pH控制在7.5-8.5，迅速产生各种二元酸。当本方法用于nC₁₄发酵生产DC₁₄时，在10L自控罐内，发酵6天，DC₁₄产量高达201g/L，DC₁₄的纯度达到97-98％。

主权项

1.一种利用微生物同步发酵正十四烷生产十二烷1，12-二羧酸的方 法，包括菌种筛选、种子液的培养、发酵转化、产物分离提纯等步骤， 其特征在于： (1)把用热带假丝酵母突变株NP-6-5，CandidaTropicalis mutantNP-6-5，CGMCCNO.0669，培养成的种子液接入PH为 5.5-9.0，含有15-45％，V/V，正十四烷和85～55％，V/V，发酵培养基的混 合液中。发酵培养基的组成为：碱金属磷酸盐6～14g/L，氯化钠0.5～ 2.0g/L，酵母膏1～6g/L，玉米浆0.5～3.0g/L，尿素0.5～2.5g/L， 硝酸盐5～15g/L，蔗糖10～30g/L，VC0.05～0.3g/L。 (2)上述混合物在2532℃维持48-170小时。 (3)将产生的十二烷1，12-二羧酸(DC₁₄)进行分离提纯。 (4)开始发酵时，混合液中正十四烷含量为10～20％V/V， 以后在适当时间补加正十四烷，使发酵液中正烷烃浓度始终大于 5％V/V。