猪笼草工厂化快繁方法

摘要

本发明涉及猪笼草工厂化大规模试管快繁方法，包括以猪笼草侧芽、顶芽及带潜伏芽的枝条为外植体，对其进行脱分化及再分化的诱导。对于组培继代得到的试管成苗，在100％草炭中无菌过渡2-3周，pH值约5.4-5.8，再经过三至四个月的培养，就可得到5-6片叶，株高10-13厘米，可达销售水平的商品苗。本方法设备简单、成本低、节省土地、繁殖快、不受野生食虫植物资源日益减少的约束、不受季节和地域限制，是一种便于工厂化生产的有效方法。

主权项

1.一种猪笼草工厂化快繁方法，其特征在于包括组培试管苗的快繁过程和无土栽培过程，所述组培试管苗的快繁过程包括：1)猪笼草外植体的采集准备为：选择生长健壮且无病虫害的盆栽猪笼草为母株，在其叶腋处，施用25-50ppm的BA，每隔3-7天施用一次，大约经过30-40天后，母株每节腋芽陆续生出并长大，可供随时采集；2)猪笼草外植体的采集为选择芽长约0.5-1.5厘米、生长健壮且无病虫害的顶芽、侧芽或带潜伏芽的枝条为外植体，流水冲洗；3)外植体的消毒、接种，即将选定的外植体进行浸泡、消毒和冲洗后，接种在1/3MS+BA 0.1-6ppm+NAA 0.1-5ppm或1/2LS+BA 0.1-6ppm+IBA 0.1-2ppm的培养基上；4)外植体的脱分化诱导，即接种在1/2LS+BA 0.1-6ppm+IBA 0.1-2ppm的培养基上，黑暗预处理6周，温度21-28℃；然后转移至1/2LS+BA 0.1-6ppm+NAA 0.1-2ppm培养基上，置于光下培养，光照为2000-3000LUX，温度为21-28℃，再经三个月的培养，可产生丛生芽；将丛生芽切割培养，芽丛每三至四个月继代一次，增殖率为5-10；5)外植体的再分化及试管苗的继代，即接种在1/3MS+BA 0.1-6ppm+NAA 0.1-5ppm培养基上的外植体经过4-5个月的培养，株高可达4-5厘米，生3-4个侧芽；将新生侧芽切割、转接，每隔三至四个月继代一次，增殖率为3；6)试管苗的生根，即将株高2-3厘米、具有3-4片叶的健壮试管苗从分化培养基移至1/3MS+NAA 0.1-2ppm培养基中进行生根，加少量活性炭；大约6周后基部即可生出3-5条根；所述无土栽培过程包括：(1)草炭基质消毒：采用100％的草炭作为基质，PH值在5.4-5.8，将100％草炭置于培养瓶中，1.1千克每平方厘米高压灭菌20分钟；(2)无菌苗过渡，即选择已生根的无菌苗，转移至上述草炭基质中进入继续无菌培养期：2-3周，湿度缓慢降低；在以后的培养中，湿度保持在60％--80％光照保持在5000LUX；(3)经上述过渡的试管苗暴露到外界环境中，并控制湿度和温度：湿度保持在60％--80％，温度控制在15-28℃；(4)经过3-4个月的培养，可长成具有5-6片叶，株高10-13厘米，带有两个小笼子的可销售的商品苗；在此期间，保持培养基质湿润，可少量施肥。