使用纯化的抗原特异性抗体检测军团菌属细菌的方法

摘要

从军团菌属菌种或菌种血清型细菌分离得到基本无蛋白的O-糖或O-多糖抗原，并与活化层析柱偶联。用如此制备的层析柱纯化针对军团菌属的同一菌种或菌种血清型的未加工抗体。用得到的抗原特异性抗体在免疫化学试验中检测人中军团病、庞蒂亚克热和其它军团菌导致的疾病，并用于检测环境样品中的军团菌属细菌。本发明详细描述了一种在免疫层析试验装置中进行的快速、高特异性和灵敏的侵肺军团菌血清1型的免疫试验。

主权项

1.一种检测液体中军团菌属至少一种细菌或血清型的细菌、或其糖抗原成分存在的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(a)将已鉴定的军团菌属菌种或菌种血清型的细菌培养至合适大小，收集湿细胞沉淀形式的该菌种或菌种血清型的细胞；(b)用一系列步骤从所述湿细胞沉淀中获得基本无蛋白质的糖抗原，这些步骤包括(i)将所述湿细胞沉淀悬浮在碱性溶液中并混合；(ii)用强酸将pH调节到酸性pH；(iii)将步骤(ii)的混合物分成两层；(iv)收集上层，将其pH调节到约中性；(v)在步骤(iv)的产物中加入广谱蛋白酶，消化破坏剩余蛋白质；(vi)将步骤(v)的产物pH用弱碱水溶液调节到碱性一侧和；(vii)分离出基本无蛋白的糖抗原；(c)通过间隔分子将步骤(b)中得到的基本无蛋白质的糖抗原与层析亲和柱交联；(d)将针对如步骤(a)中培养的同一军团菌属菌种或菌种血清型的抗体通过步骤(c)的亲和层析柱，产生纯化的抗原特异性抗体；和(e)对怀疑含有如步骤(a)中培养的同一军团菌属菌种或菌种血清型的液体样品进行试验，该试验包括步骤：通过使液体样品接触主要含有步骤(d)的纯化抗原特异性抗体的检测剂，检测所述军团菌属菌种或菌种血清型的糖抗原。