主权项 |
1.本发明涉及一种阴离子型层状材料固定化酶的制备方法,其特征是按以下步骤制备该固定化酶:A:制备层板二价、三价金属阳离子摩尔比为1.6-4.5∶1的类水滑石,取一定量的该类水滑石加入到盛有去离子水的容器中配制浓度为0.2-2M的悬浮液,室温下磁力搅拌,按类水滑石与客体分子完全反应计加入过量客体分子,此时容器中由浑浊液变为澄清溶液,备用;用浓度为0.01-0.5M的NaOH稀溶液,加入带冷凝和搅拌的反应器中,一边搅拌,一边滴加上述备用澄清溶液,保持滴加过程pH>9,滴加结束后,冷凝回流约6h,过滤、用热水充分洗涤至pH<8,于85℃左右干燥,得到层间组装了客体分子的类水滑石层柱材料;B:按从A得到的类水滑石层柱材料与水的重量比为1∶50-80的比例加入带磁力搅拌的反应器中,按该类水滑石与交联剂的重量比为1∶1-3的比例,向反应器中加入5%wt浓度交联剂,磁力搅拌1小时左右,过滤,充分水洗;将洗好的滤饼放入容器,加入去离子水和磷酸缓冲液以保护酶分子的催化活力,按类水滑石层柱材料与液体酶的固液比为1∶6-12的比例加入需固定的酶,于摇床中在一定温度下固定约20h,经离心分离,充分水洗,得到固定化酶。 |