用沉降－过滤－嗜硫色谱法规模制备鸡蛋特异性抗体

摘要

本发明提供一种用沉降—过滤—嗜硫色谱法规模制备鸡蛋特异性抗体，它是采用一步沉降处理蛋黄液、一次膜微滤除脂、单步嗜硫色谱分离纯化抗体，从而使本发明具有制备步骤少、设备和操作简单、运行费用低等优点，且活性回收率高(大于70％)、纯度大于95％，可实现鸡蛋抗体的大批量、高纯度、高效率、规模化制备，批制备量至少可达5克，并可根据需要简单地扩大。

主权项

1、一种用沉降—过滤—嗜硫色谱法规模制备鸡蛋特异 性抗体的方法，其特征是其操作步骤如下： 1)用蒸馏水将蛋黄稀释5～15倍，混合均匀后，在蛋 黄稀释液中加入pH值为4～8、浓度为0，01～0.5M 的柠檬酸—磷酸氢二钠缓冲液，在4℃下一步沉降样 品，取沉降上清液； 2)用1～10％的硅藻土助滤剂进行预涂布后，对沉降上 清液进行一次膜微滤，取其滤液； 3)在高盐条件下，使滤液在15～25℃时流过嗜硫性吸 附色谱柱，以吸附其中的特异性抗体IgY； 4)在低盐条件下，将特异性抗体IgY洗脱出来。