| 主权项 |
1.一种无乳糖基因启动子诱发物之细菌完全培养基,包含:一培养物,系为一种有机成分;一添加物,以及一抑制物,系为-乳醣水解(-galactosidase),用以抑制该培养基中乳糖基因启动子之诱发物。2.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该完全培养基适于培养一大肠杆菌。3.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该完全培养基之组成材料系为纯化自一生物之有机成分。4.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该培养物系选自于胰化蛋白(tryptone)、蛋白(peptone)、酵母抽出物(yeastextract)、酪蛋白氨基酸(casamino acid)以及NZ amine等其中之一。5.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该添加物系为选自于一抗生素、一盐类与一洋菜胶等其中之一。6.如申请专利范围第5项所述之培养基,其中该抗生素系为选自于青霉素(ampicillin)与康霉素(kanamycin)两者其中之一,用以筛选所欲培养之细菌。7.如申请专利范围第5项所述之培养基,其中该盐类为氯化钠。8.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该-乳醣水解之反应pH値介于6.5-8.5之间。9.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该-乳醣水解之反应温度介于15-45℃之间。10.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该-乳醣水解之作用浓度介于0.02-2单位/毫升。11.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该为-乳醣水解之最佳浓度为0.25单位/毫升。12.如申请专利范围第1项所述之培养基,其中该-乳醣水解可纯化自一大肠杆菌与一其他来源之同功。13.如申请专利范围第12项所述之培养基,其中该其他来源之同功系为纯化自一米麴菌(Aspergillus oryzae)。14.一种无乳糖基因启动子诱发物之细菌完全培养基之制备方法,其步骤为:(1)提供一培养物,用以成长所欲培养之细菌;(2)提供一添加物,用以添加入该培养物中;(3)提供一抑制物,系为-乳醣水解(-galactosidase),用以抑制该培养基中乳糖基因启动子之诱发物;以及(4)经灭菌后,以得到该无乳糖基因启动子诱发物之细菌完全培养基。15.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该步骤(3)先于步骤(2)实施。16.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该步骤(1)可另包含一步骤,系为选自于在该培养物中加入盐酸调整pH値为4.5与在该培养物中加入氢氧化纳调整pH値为7.4二者其中之一方法实施之。17.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该步骤(3)需先经一静置步骤,以使该抑制物能完全作用于该培养物。18.如申请专利范围第17项所述之方法,其中该静置步骤系选自于置于37℃下,2小时与置于30℃下,3小时其中之一方法实施之。19.如申请专利范围第18项所述之方法,其中该静置步骤中之该培养物为先加入盐酸调整pH値为4.5时,需于静置步骤后调整其pH値至中性。20.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该完全培养基适于培养一大肠杆菌。21.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该完全培养基之组成材料系为纯化自一生物之有机成分。22.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该培养物系选自于胰化蛋白(tryptone)、蛋白(peptone)、酵母抽出物(yeast extract)、酪蛋白氨基酸(casamino acid)以及NZamine等其中之一。23.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该添加物系为选自于一抗生素、一盐类与一洋菜胶等其中之一。24.如申请专利范围第23项所述之方法,其中该抗生素系为选自于青霉素(ampicillin)与康霉素(kanamycin)两者其中之一,用以筛选所欲培养之细菌。25.如申请专利范围第23项所述之方法,其中该抗生素可于步骤(4),培养基冷却后,添加之。26.如申请专利范围第23项所述之方法,其中该盐类为氯化钠。27.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该-乳醣水解之反应pH値介于6.5-8.5之间。28.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该-乳醣水解之反应温度介于15-45℃之间。29.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该-乳醣水解之作用浓度介于0.02-2单位/毫升。30.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该为-乳醣水解之最佳浓度为0.25单位/毫升。31.如申请专利范围第14项所述之方法,其中该-乳醣水解可纯化自一大肠杆菌与一其他来源之同功。32.如申请专利范围第31项所述之方法,其中该其他来源之同功可纯化自一米麴菌(Aspergillus oryzae)33.一种大肠杆菌之细菌完全培养基,包含:一培养物,系为一种生物性有机成分;一添加物,用以筛选所欲培养之细菌;以及一抑制物,系为-乳醣水解(-galactosidase),用以抑制该培养基中乳糖基因启动子诱发物。图式简单说明:图一(A)及(B):其系显示SG 13009与JM109菌株于普通2YT培养基与经-乳醣水解处理过之2YT培养基培养之重组小鼠瘦蛋白的表现能力的结果。图二(A)及(B):其系显示SG 13009与JM109菌株于普通LB培养基与经-乳醣水解处理过之LB培养基培养之重组小鼠瘦蛋白的表现能力的结果。图三:其系显示JM109菌株于经不同量之-乳醣水解处理过之LB培养基培养之重组小鼠瘦蛋白的表现能力的结果。图四:其系显示JM109菌株于胰化蛋白及/或酵母粹取物以-乳醣水解处理过之LB培养基培养之重组小鼠瘦蛋白的表现能力的结果。图五:其系显示SG 13009菌株于LB培养基与经源自米麴菌之-乳醣水解处理过之LB培养基培养之重组人类瘦蛋白的表现能力的结果。 |
