一种多种病原体标本检测的新方法

摘要

本发明涉及一种生物技术产品的应用，具体地说是结合基因芯片及PCR技术进行多份病原体标本的检测。本方法利用基因条码技术定向、自动识别的特点以及PCR扩增可对扩增序列进行5’端修饰的特性，可实现通过芯片的一次杂交分析成十上百份的标本的目的；同时结合复合探针技术，将一对基于荧光能量传递原理设计的报告探针和淬灭探针用于芯片杂交，使过量的报告探针被淬灭探针所淬灭，使芯片杂交后无需进行多步洗涤即能达到较低的背景，减少了操作步骤，提高了分析效率。

主权项

1.一种多病原体标本检测的新方法。其特征在于，设计合成待检病原体基因的特异扩增引物及报告探针和淬灭探针，其中一条引物向5’端延伸一段寻址条码序列，该序列与引物间有一间隔臂，可阻止PCR延伸，并且该序列与固定在通用芯片上的可寻址捕获探针互补，通过PCR扩增使产物的末端连上一段可寻址的条码序列，然后将所有PCR扩增产物混合，与报告探针、淬灭探针一起加入到杂交体系，与通用芯片进行杂交，这样这些PCR产物上连接的可寻址条码序列与芯片上互补的寻址捕获探针杂交，从而将扩增产物定向地锚定在芯片对应位置上，被锚定的PCR产物再与荧光等报告分子标记的特异报告探针杂交，通过信号扫描等分析即可检测出每份样品的结果。