检测VEGF激酶结构域调节剂的方法

摘要

本发明涉及检测化合物药理活性的测定，尤其是用于检测大鼠血管内皮生长因子受体(大鼠VEGF－R2)激酶结构域调节剂的测定。

主权项

1.一种测定推定VEGF-R2调节化合物作用的方法，该方法包括下列顺序步骤：A)提供适合大鼠VEGF-R2催化活性而且含有作为磷酸根源的 33P-γ-ATP的以下组分溶液：受试化合物、大鼠VEGF-R2激 酶融合蛋白以及包含亲合部分和大鼠VEGF-R2磷酸化位点 的激酶底物；B)使所述受试化合物、激酶融合蛋白和激酶底物接触足够时间， 以便产生33P磷酸化底物；C)在多孔检测板中通过亲和捕获分离磷酸化激酶底物；D)首先吸出水溶液，然后用第二种溶液洗涤板，从而除去残存 的33P-γ-ATP；E)监测在存在所述受试化合物下所述激酶使33P转移到底物中的 比率或绝对量，从而检测激酶活性变化。