利用交变脉冲电泳进行植物种子转基因的方法

摘要

本发明利用交变脉冲电泳进行植物种子转基因的方法，特征是用一般的琼脂糖制作与包埋胶同样浓度的电泳支持胶；将熔化的支持胶倒入电泳槽内，待其冷却凝结后，在位置挖一能容纳包埋胶的凹槽，然后用分析纯的低熔点琼脂糖胶液把制备好的含有种子的包埋胶块封固在凹槽中；将要转移的外源DNA样品放在位于电泳起始位置的点样长槽中；以试验确定的交变脉冲电场强度和转换间隔时间进行交变脉冲电泳，至电泳指示剂越过样品包埋胶；最后除去种子外面的包埋胶。采用本方法可在常温、常压及低电压的状态下，直接地、无损伤地对完整的、批量的植物种子进行交变脉冲电泳转基因，大大地提高了转基因的效率，扩大了转基因的范围。

主权项

1、一种利用交变脉冲电泳进行植物种子转基因的方法，其特征在于包括以下步骤：将分析纯的低熔点琼脂糖熔化，在胶液冷却到30℃(±5℃)时把包埋前进行消毒、浸种处理的种子悬浮其中，然后冷却凝结；包埋胶块的大小为支持胶的1/3，厚度为支持胶厚度的1/2；用一般的琼脂糖制作与包埋胶同样浓度的电泳支持胶；将熔化的支持胶倒入电泳槽内，待其冷却凝结后(25℃-0℃)，在中央位置挖一能容纳包埋胶的凹槽，然后用分析纯的低熔点琼脂糖胶液把制备好的含有种子的包埋胶块封固在凹槽中；将要转移的外源DNA样品放在位于电泳起始位置的点样长槽中；以试验确定的交变脉冲电场强度和转换间隔时间进行交变脉冲电泳，至电泳指示剂越过样品包埋胶；最后除去种子外面的包埋胶。