Erzeugung von schwach aktiven oder inaktiven Mutanten von Alkalischer Phosphatase und deren Expression in Hefe

摘要

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur rekombinanten Herstellung bzw. Expression von eukaryotischen alkalischen Phosphatase-Mutanten in Hefezellen, wobei die gezielt eingeführten Mutationen eine Reduktion der spezifischen AP-Aktivität um mindestens den Faktor 1 : 100 bewirken. Die Erfindung betrifft ferner ein Verfahren zur Insertion entsprechender Nukleinsäuresequenzen in einen Vektor zur Expression in methylotrophen Hefe-Stämmen sowie entsprechende Vektoren und Wirtsstämme.