人工栽培北冬虫夏草提高其生理活性物质含量的方法

摘要

本发明涉及一种人工栽培北冬虫夏草提高其生理活性物质含量的方法，具体为：菌种分离：将新鲜野生北冬虫夏草洗净，切片；2)斜面菌种培养：将培养基调pH为6～7，灭菌后做成斜面，将1)中切片置于培养基上，20～25℃下7～10天；3)液体菌种培养：将培养基调pH为6～7，灭菌，接入步骤1)斜面培养的菌种，液体培养；4)固体栽培：固体栽培主要成分为大米、高粱米，按所述原料总重量的1.4～1.8倍加入营养液，封好容器口灭菌，再以5～6倍稀释，破碎，按每份固体栽培培养基体积加0.2～0.5倍稀释后的液体菌种在25～29℃温度下，避光，散射光培养，通气，40～60天子实体成熟。它能提高其主要生理活性物质虫草酸(D－甘露醇)、虫草素(3－脱氧腺苷)、虫草多糖的含量。

主权项

1.一种人工栽培北冬虫夏草提高其生理活性物质含量的方法，其特征在于：按如下工艺流程操作：(1)菌种分离：将新鲜野生北冬虫夏草洗干净，按体积百分比计采用0.1～0.3％浓度的二氯化汞HgCL2、70～75％浓度的乙醇或10～30％浓度的双氧水H2O2作为表面消毒剂，3～5分钟后，无菌水冲洗5～10次，无菌条件下将其切成薄片，待用；(2)斜面菌种培养：培养基成分按重量百分比计，其成分为葡萄糖1～2％，蛋白胨0.5～2.0％，酪素0.5～2％，磷酸二氢钾0.05～0.10％，马铃薯20～30％，硫酸镁0.03～0.05％，VB1、VB2微量，琼脂18～20％，余量为水；调pH为6～7，装容器内灭菌，然后将容器内的培养基做成斜面，将切成薄片的新鲜野生北冬虫夏草置于马铃薯斜面培养基上，20～25℃下7～10天长出白色菌落，供菌种培养；(3)液体菌种培养：培养基成分按重量百分比计，为葡萄糖0.5～1.0％，蔗糖0.5～1.0％，蛋白胨0.5～2.0％，酪素1.0～1.5％，硫酸镁0.03～0.05％，磷酸二氢钾0.05～0.10％，VB1、VB2微量，马铃薯的含量20～30％，余量为水；调pH为6～7，将液体培养基装入容器内灭菌，冷却后接入步骤1所述斜面培养的菌种，振荡或静止培养，培养温度为23～29℃，7～10天长出白色菌落，供固体栽培使用；(4)固体栽培：固体栽培主要成分为大米、高粱米，两者投放重量比为大米：高梁米1～2∶1，然后按所述原料总重量的1.4～1.8倍加入营养液，封好容器口灭菌，作为固体栽培培养基待用；所述营养液按重量百分比计，其成分为0.5～1％玉米粉，0.3～1.0％蛋白胨，0.3～0.5％酪素，0.5～1％去皮及内脏的蚕蛹浆，0.05～0.10％磷酸二氢钾KH2PO4，0.03～0.05％硫酸镁MgSO4，微量的VB1、VB2，余量为水(5)将所述培养好的液体菌种以5～6倍稀释，再破碎，按每份固体栽培培养基体积加0.2～0.5倍稀释后的液体菌种，在25～29℃温度下，避光培养7～10天，然后散射光培养，于19～25℃温度、60～80％湿度、菌丝体长满栽培基体的表面条件下通气，40～60天子实体成熟。