体外诱导人胚胎干细胞定向分化为表皮干细胞的方法

摘要

本发明涉及一种体外诱导人胚胎干细胞定向分化为表皮干细胞的方法。本技术包括人ES细胞的培养、羊膜的制备纯性分离和外诱导人ES细胞分化为人表皮样干细胞等步骤。本发明具有方法简便、重复性好、成功率高，全性好，来源丰富经济等优点。

主权项

1、一种体外诱导人胚胎干细胞定向分化为表皮干细胞的方法，其特征在于包括如下步骤：A.人ES细胞的培养 把人的ES细胞系CH2在人ES细胞的完全培养液培养；B.羊膜的制备纯性分离 除去足月妊娠剖腹产胎盘的绒毛膜用含庆大霉素的生理盐水冲洗羊膜，羊膜的上皮面向上平铺在硝酸纤维膜上，放入37℃培养箱中3～4h，然后加入无LIF的ES细胞培液过夜；C.外诱导人ES细胞分化为人表皮样干细胞 取人ES细胞，用0.5～0.125％EDTA消化液消化，按5×103～6细胞/接种于铺有羊膜的6孔板中，用无LIF的ES细胞培液培养3～6天，每隔24换一半培液，培养第2～6天后，贴附在羊膜上皮面上的细胞分化为上皮样干细胞。