| 主权项 |
1.一种形成固定化之透明质酸的方法,包括下列步骤:a.提供透明质酸,并使其产生醛基;b.提供一具生物相容性之高分子膜,并使其胺基化;c.将所述具醛基的透明质酸放置到所述已胺基化之高分子膜上;以及d.使所述具醛基的透明质酸和已胺基化之高分子膜形成共价键结。2.如申请专利范围第1项之形成固定化之透明质酸的方法,其中使透明质酸产生醛基之方法,系包含:a.进行透明质酸的制备;b.针对透明质酸的还原终端(reducing end)进行开环反应;c.对该还原终端已开环之透明质酸进行氧化反应,使所述透明质酸产生醛基。3.如申请专利范围第2项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述透明质酸的制备,首先将其溶解于酸性溶液中,接下来加入酵素,使其与所述透明质酸的溶液起反应,再以凝胶过滤层析法(GFC)进行分离与纯化。4.如申请专利范围第3项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述酸性溶液系NaC1/NaCH3COO溶液中,其pH値介于5.0至6.0之间。5.如申请专利范围第3项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述NaC1/NaCH3COO溶液的浓度介于0.10M至0.20M之间。6.如申请专利范围第2项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述开环反应系首先将所述透明质酸溶于四硼酸钠(sodiumborate;Na2B4O7)的溶液中,待其完全溶解后,于室温中加入硼氢化钠(sodium borohydride;NaBH4),以针对所述透明质酸的还原终端进行开环反应。7.如申请专利范围第6项之形成固定化之透明质酸的方法,所述其中所述四硼酸钠的浓度介于0.03M至0.07M之间,其酸硷度介于pH8.5至pH9.0之间。8.如申请专利范围第6项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述开环反应的反应时间介于10小时至14小时之间。9.如申请专利范围第6项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述终止开环反应的方法是在溶液中加入冰醋酸,将溶液的酸硷度调整至pH4.0至pH5.0之间。10.如申请专利范围第2项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述氧化反应系先将已开环之透明质酸溶于间二氮茂(imidazole;C3H4N2)中,待溶解后,加入固定比例的过碘酸钠(NaIO4)以将所述透明质酸反应为醛基。11.如申请专利范围第10项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述间二氮茂的浓度介于0.03M至0.05M之间,酸硷度介于pH6.0至pH6.7之间。12.如申请专利范围第10项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述氧化反应系在冰点左右进行,其反应时间介于50分钟至70分钟之间。13.如申请专利范围第1项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述具生物相容性之高分子膜系选自下列群组:聚乙烯(Polyethylene;PE)及聚丙烯(PP)、聚四氟乙烯(Polytetrafluoroethylene)、聚醯胺(Polyamide)、聚酯类(Polyesters)、聚碳酸酯(PolyCarbonates)、聚甲基丙烯酸甲酯(PolymethylMethacrylate)、聚醚类(Polyethers)、聚丙烯(Polyacrylonitrile;PAN)、聚胺基甲酸酯(PU)、聚甲基丙烯酸氢氧基乙酯(Poly(HEMA))、以及聚甲基丙烯甲酯等等。14.如申请专利范围第1项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述具生物相容性之高分子膜系聚胺基甲酸酯(PU)膜。15.如申请专利范围第14项之形成固定化之透明质酸的方法,使具生物相容性之高分子膜胺基化的方法,是利用氮气电浆进行处理。16.如申请专利范围第15项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述进行电浆胺基化处理的方法系包含:a.将所述聚胺基甲酸酯膜置于电浆反应器中之电极板上,并抽真空;b.通入氨气;以及c.进行电浆处理。17.如申请专利范围第16项之形成固定化之透明质酸的方法,当进行电浆处理时,所述电浆反应器的功率调整至20瓦至40瓦之间。18.如申请专利范围第17项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述电浆处理的反应时间介于6分钟至14分钟之间。19.如申请专利范围第18项之形成固定化之透明质酸的方法,在所述反应时间终了之后,更包含关掉电浆反应器的电源功率并持续保持真空,使该聚胺基甲酸酯膜在氨气的环境下静置的步骤。20.如申请专利范围第1项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述将所述具醛基的透明质酸放置到所述已胺基化之高分子膜上的方法,系先将还原终端已被修饰为醛基之透明质酸溶解成一溶液,并将该溶液数毫升滴至装有已胺基化之聚胺基甲酸酯膜的适当容器内,在室温下反应3小时。21.如申请专利范围第20项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述将透明质酸溶解的方法,是将还原终端已被修饰为醛基之透明质酸以每毫升4毫克的比例溶于四硼酸钠(sodium borate;Na2B4O7)的溶液中,待其完全溶解,其中所述四硼酸钠的浓度介于0.03M至0.07M之间,其酸硷度介于pH8.5至pH9.0之间。22.如申请专利范围第14项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述使所述具醛基的透明质酸和已胺基化之聚胺基甲酸脂(PU)膜形成共价键结的方法,是在滴有具醛基之透明质酸溶液之所述已胺基化之聚胺基甲酸酯(PU)膜上加入一还原剂。23.如申请专利范围第22项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述还原剂是NaCNBH3。24.如申请专利范围第22项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述还原剂是H2/Pd。25.如申请专利范围第22项之形成固定化之透明质酸的方法,使所述透明质酸和聚胺基甲酸酯膜形成共价键结之后,更包含:a.将所获得之固定有透明质酸的聚胺基甲酸酯膜置入培养皿中并加入1,4-丁二醇二缩水甘油醚(1,4─Butanediol Diglycidyl Ether;BDDE)溶液;b.滴以透明质酸的氢氧化钠溶液与1,4-丁二醇二缩水甘油醚(1,4─Butanediol Diglycidyl Ether;BDDE)混合溶液,反应时间介于14小时至18小时之间,再将水分抽乾;c.重复步骤a及步骤b,直到所述聚胺基甲酸酯膜上含有一特定量的透明质酸衍生物。26.如申请专利范围第25项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述特定量的透明质酸衍生物为每平方公分10毫克。27.如申请专利范围第22项之形成固定化之透明质酸的方法,使所述透明质酸和聚胺基甲酸酯膜形成共价键结之后,更包含:a.将所获得之固定有透明质酸的聚胺基甲酸酯膜置入培养皿中,并在所述聚胺基甲酸酯膜上滴入一特定量的透明质酸;以及b.将所述聚胺基甲酸酯膜置入电浆反应器中,以氮气电浆进行轰击,使所加入的透明质酸与聚鞍基甲酸酯膜形成共价键。28.如申请专利范围第27项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述氮气电浆的功率介于20瓦至40瓦之间,反应时间介于5分钟至15分钟之间,再静置20分钟至40分钟。29.如申请专利范围第25项或第27项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述透明质酸系短键的透明质酸(oligo HA)。30.如申请专利范围第22项之形成固定化之透明质酸的方法,其中所述共价键结的反应时间介于20小时至30小时之间。31.一种固定有透明质酸的聚胺基甲酸酯膜,其特征在于,所述透明质酸系以共价键键结在所述聚胺基甲酸酯膜上。32.如申请专利范围第31项之固定有透明质酸的聚胺基甲酸酯膜,其中所述透明质酸系长键的透明质酸。33.如申请专利范围第31项之固定有透明质酸的聚胺基甲酸酯膜,其中所述透明质酸系短键的透明质酸。图式简单说明:图一为本发明形成固定化之多醣类之方法的流程图。图二为本发明的一个实施例中使透明质酸产生醛基之方法的流程图。 |
