| 主权项 |
1.一种栀子细胞组织培养生产天然生根剂的方法，所生产的生根剂中除含有部分色素和糖外，主要含有栀子甙1～9‰，羟异栀子甙1～9‰，京尼平-1-0-龙胆双糖甙1～9‰，该方法包括栀子细胞组织的建立、培养及栀子甙提取步骤，其特征在于：(1)采用的栀子细胞组织是由栀子叶诱导产生的愈伤组织；栀子愈伤组织的诱导过程是：取栀子植株上的叶片，清洗，消毒，切片，平铺在改良的固体MS培养基上，温度为20～30℃，湿度60～85％，光强1000～3000lx条件下培养20～40天，叶片切口部分隆起，长出的一团团淡黄色细胞团即为栀子愈伤组织；(2)所使用的培养基为改良的MS培养基，组分如下：大量元素： NHL4NO3 1000～2000(mg/L) KNO3 1500～2500 CaCl2·2H2O 300～500 MgSO4·7H2O 150～200微量元素： KI 1.5～1.7 H3BO3 5.5～7.0 MnSO4·7H2O 20～25 ZnSO4·7H2O 5～15 Na2MoO4·2H2O 0.1～0.5 CuSO4·5H2O 0.01～0.03 CoCl2·6H2 0.01～0.03 Na2EDTA 35～40 FeSO4·7H2O 20～30生长调节物质：肌醇 80～120 烟酸 0.3～0.7 盐酸吡哆醇B1 0.3～0.7 盐酸硫胺素B6 0.05～0.2 甘氨酸 1.0～3.0 α-萘乙酸(NAA) 0.5～5激动素(KT) 0.05～0.5蔗糖 1.0～5.0琼脂 0～5.0pH值 5.0～6.5(3)栀子细胞的培养条件(a)固体培养改良的MS固体培养基，接种量1～5g/100ml，温度20～30℃，湿度60～85％，光强1000～3000lx；(b)液体培养改良的MS液体培养基，接种量1～5g/100ml，温度20～30℃，转速50～150rpm，光强1000～3000lx；(4)将栀子细胞用甲醇浸提，得栀子甙的提取液。 |
