动物乳腺内表达成纤维细胞生长因子（FGF）的重组DNA的构建方法

摘要

本发明涉及一种用分子生物学技术在乳汁中获得成纤维细胞生长因子的方法，克服了用现有技术提取或人工生产成纤维细胞生长因子之技术难度大、成本高、产量低等不足，将包含有动物乳蛋白基因启动子和/或增强子的DNA片段与成纤维细胞生长因子DNA的完整或不完整片段直接或通过T7RNA聚合酶与T7启动子偶连系统等方法间接相连，经过一些必要的修饰后装入适当的DNA载体，构成重组DNA，经过克隆筛选、扩增、纯化之后，与脂质体等物质混合，然后直接注入动物的乳腺导管内，让重组DNA进入乳腺分泌细胞，或用常规的建立生物反应器的方法建立乳腺定位表达生物反应器，在分泌细胞分泌乳汁时，重组DNA得以表达，用常规的方法挤得乳汁，可从乳汁中获重组DNA的表达产物——成纤维细胞生长因子，本方法具有方法简单、成本低、成纤维细胞生长因子活性高、产量高等优点。

主权项

1·一种用分子生物学技术构建重组DNA以在动物乳汁中获得成纤维细胞生长因子的方法，其特征是将包含有动物乳蛋白基因启动子和/或增强子的DNA片段与成纤维细胞生长因子DNA的完整或不完整片段直接或间接相连，经过一些必要的修饰后装入适当的DNA载体，构成重组DNA，以此重组DNA配合乳腺导管内注射或其它建立生物反应器的方法，在乳汁中获得活性成纤维细胞生长因子。