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<p>Un método para proveer una cepa microbiana que comprende un gen que codifica una enzima con actividad de endoglucanasa, donde dicha enzima comprende una primera y una segunda secuencia de aminoácidos, donde la primera secuencia de aminoácido es: 1 y la segunda secuencia de aminoácidos es 2, en la cual, en la posicion 3 de la primera secuencia, el aminoácido es Trp, Tyr o Phe; en la posicion 4 de la primera secuencia, el aminoácido es Trp, Tyr, Phe; en la posicion 8 de la primera secuencia, el aminoácido es Arg, Lys o His; en las posiciones 9, 10, 12 y 14, respectivamente, de la primera secuencia, y en la posicion 4 de la segunda secuencia, el aminoácido es cualquiera de los 20 residuos aminoácidos naturales, con las condiciones que, en la primera secuencia de aminoácidos, (i) cuando el residuo de aminoácidos en la posicion 12 es Ser, entonces el residuo de aminoácido en la posicion 14 no es Ser, y (ii) cuando el residuo de aminoácido en la posicion 12 es Gly, entonces el residuo de aminoácido en la posicion 14 no es Ala, que comprende las etapas de: (a) aislar ADN genomico a partir de una cepa microbiana y/o generar ARNm y transcribirlo en forma reversa a ANDc; y (b) rastrear el ADN genomico aislado o el ADNc mediante (i) hibridizacion del ADN genomico con un oligonucleotido preparado a partir de las secuencias mostradas como SEC. ID. Nos: 2, 5, 7, 9, 11, 13 y 17 bajo las siguientes condiciones de hibridizacion: 2 x SSC, 5x solucion de Denhardt 0,5% SDS, 100 micron/ml de ADN de esperma de salmon desnaturalizado durante 20 horas a 65 degree C, seguido de dos lavados en 5 x SSC a 25 degree C; o (ii) amplificacion del ADN o ADNc mediante la reaccion en cadena de la polimerasa ( PCR) empleando cebadores de oligonucléotidos sentido y antisentido derivados de la region conservada mostrada en SEC. ID Nos: 2, 5, 7, 9, 11, 13 y 17.</p> |
