主权项 |
1.一种利用分子印迹法对神经酰胺进行分离纯化的方法,其特征在于该方法包括如下步骤:(1)将亲水单体甲基丙烯酸、甲基丙烯酸酯类、丙烯酸或丙烯酸酯类中的一种或两种与疏水单体苯乙烯和超分子单体含有乙烯基的β-环糊精混合后再分别与交联剂、致孔剂、引发剂和印迹分子神经酰胺标样混合,其中:a.疏水单体与亲水单体的物质的量的比为0.25~1;b.超分子单体含有乙烯基的β-环糊精与疏水单体物质的量的比为0.01~0.1;c.交联剂与单体的物质的量的比为0.5~20;d.印迹分子与单体的物质的量的比为0.01~1;e.致孔剂用量为反应混合物体积含量的40~75%;(2)将上述反应混合物超声混和均匀,加入到反应器中,原位聚合,聚合温度控制在65~85℃之间,反应时间为6~24小时;(3)聚合反应结束后,将合成的聚合物从反应器中取出,研磨,利用有机溶剂抽提,干燥后筛分,装填到色谱柱管中,得到分子印迹分离柱;(4)利用体积比例为2∶1的氯仿与甲醇混合溶液从酵母中提取出脂类物质,干燥后得到提取物样品,再溶入氯仿,配成溶液;(5)将上述溶液加入到色谱柱中,用有机溶剂冲洗去除非神经酰胺类的脂类物质,然后再用有机溶剂洗脱,收集洗脱组分。 |