一种聚合酶链反应介导的DNA结合蛋白检测试剂及使用方法

摘要

本发明涉及的是一种聚合酶链反应介导的DNA结合蛋白检测试剂及使用方法。其检测试剂是一组双链寡核苷酸序列，每一双链寡核苷酸序列的中间部分包含一种待检测的DNA结合蛋白的DNA识别序列以及特定的限制性内切酶的识别序列，并使二者紧密相连。其使用方法为(1)将双链寡核苷酸检测试剂加入含有待测蛋白的溶液中进行孵育，使溶液中的DNA结合蛋白与其对应的双链寡核苷酸充分结合；(2)在上述溶液中加入相应的限制性内切酶进行充分消化，使未结合蛋白的双链寡核苷酸被内切酶切断；(3)在酶切产物中加入蛋白酶K完全消化，除掉产物中的蛋白质；(4)消化产物进行PCR扩增；(5)检测PCR产物，获得溶液中DNA结合蛋白的信息。

主权项

1、一种聚合酶链反应介导的DNA结合蛋白的检测试剂，其特征在于针对一组被检测的DNA结合蛋白质，设计和制备一组双链寡核苷酸序列，其中每一双链寡核苷酸序列的中间部分包含一种待检测的DNA结合蛋白的特异性识别序列以及特定的DNA限制性内切酶的识别序列，并使二者紧密相连；在双链寡核苷酸中除DNA结合蛋白识别序列外的序列是一致的。