METHOD, DEVICE FOR CARRYING OUT THIS METHOD, AND SEPARATING MEANS FOR SEPARATING PARTICLES IN FREE-FLOW ELECTROPHORESIS

摘要

Die Erfindung betrifft ein Verfahren sowie eine Vorrichtung zur Durchführung des Verfahrens und Trennmittel zum Trennen von Teilchen in der Free-Flow-Elektrophorese. Dabei umfasst dieses FFE-Verfahren unter Verwendung insbesondere einer Free-Flow-Elektrophoresevorrichtung mit einem Trennraum (14), einer Dosierpumpe zum Fördern eines Trennmediums 88), Elektroden (9, 10) zum Anlegen eines elektrischen Feldes im Trennmedium (8) sowie Probeaufgabestellen (17) zum Hinzufügen eines aufzutrennenden Gemisches von Teilchen und Fraktionierstellen (18) zum Abführen von mittels der FFE getrennten Teilchen (1, 1', 1'') im Trennmedium (8), folgende Schritte: Bereitstellen eines Trennmediums (8); Fördern des Trennmediums (8) mittels der Dosierpumpe über die Medienzuführungen (15, 15') in den Trennraum (14); Durchfliessen des Trennraums (14) mit dem Trennmedium (8); Auslassen des Trennmediums (8) über Auslässe (16); Anlegen eines elektrischen Feldes im Trennmedium (8); Kombinieren eines zu trennenden Teilchens (1', 1'') mit selektiv wählbaren Ladungsträgern (4, 5) zum Erzeugen von ladungsmodifizierten Teilchen (7', 7''), die - wegen ihrer selektiv veränderten Netto-Oberflächenladung - in der FFE ein anderes Migrationsverhalten aufweisen, als nicht-ladungsmodifizierte Teilchen (7); Hinzufügen eines aufzutrennenden Gemisches von Teilchen (1, 1', 1'') zum Trennmedium (8) im Trennraum (14) über die Probeaufgabestellen (17); Abführen von mittels der FFE getrennten Teilchen (1, 1', 1'') im Trennmedium (8) über Fraktionierstellen (18); Sammeln der Fraktionen mit den abgetrennten Teilchen. Das Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, dass zwischen dem Trennmedium (8) und mindestens einer Elektrode (9, 10) Führungs- oder Fokussierkissen (12, 13) mit einem Kissenmedium (20) erzeugt werden, wobei dieses Kissenmedium (20) eine gegenüber dem Trennmedium (8) stark erhöhte elektrische Leitfähigkeit aufweist und über separate Kanäle (15') zu diesen Fokussierkissen (12, 13) zugeführt wird.