用于生产口蹄疫疫苗的山莴苣叶绿体转化植物的获得方法

摘要

本发明涉及一种生产口蹄疫多肽疫苗的山莴苣叶绿体转基因植物获得的方法。该方法包括：口蹄疫多肽疫苗基因序列及其合成方法，如合成的SEQ ID NO：1及SEQ IDNO：2所示序列，将该序列与绿色荧光蛋白基因串联，得到融合的疫苗基因。该融合疫苗基因连接于莴苣叶绿体psbA基因启动子下游从而构建为叶绿体表达框。同时将该疫苗基因构建到SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示序列之间，构建成山莴苣叶绿体定点转化载体。用该转化载体转化山莴苣，并获得表达口蹄疫多肽疫苗的山莴苣叶绿体转基因植物。

主权项

1.一种生产口蹄疫多肽疫苗的山莴苣叶绿体转基因植物的获得方法，包括以下步骤：(1)合成口蹄疫多肽疫苗基因序列，使之与报告基因或具有强免疫源性蛋白的基因串联得到融合的疫苗基因，该融合的疫苗基因连接于莴苣叶绿体psbA基因启动子下游从而构建为叶绿体表达框；(2)构建用于向山莴苣叶绿体中定点转化外源基因的莴苣叶绿体相关DNA序列；(3)将步骤(2)构建出来的DNA序列与步骤(1)合成的融合的口蹄疫多肽疫苗基因重组，使融合的疫苗基因序列位于莴苣叶绿体相关DNA序列的中间；(4)将步骤(3)中重组得到的DNA片段插入到克隆载体的多克隆位点上，作为口蹄疫多肽疫苗基因山莴苣叶绿体定点转化载体；和(5)用得到的转化载体转化山莴苣植物细胞，获得叶绿体表达多肽疫苗的转基因植物。