用于生产口蹄疫疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法

摘要

本发明涉及一种用于生产口蹄疫多肽疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法。方法包括：克隆油菜叶绿体基因组同源重组片段SEQ ID NO：1所示序列，以及SEQ IDNO：2所示序列，并用这两个DNA片段构建油菜叶绿体定点转化载体，在载体上这两个片段之间，插有口蹄疫多肽疫苗基因(即SEQ ID NO：3及SEQ ID NO：4所示序列)与绿色荧光蛋白或其它报告基因串联而得的融合疫苗基因。并将融合基因插入一种克隆载体中。通过转基因技术，使该基因的同源重组序列与油菜叶绿体发生定点整合。再经对油菜细胞的筛选与植株诱导与培育，最终获得表达口蹄疫多肽疫苗的油菜叶绿体转基因植物。

主权项

1.一种用于生产口蹄疫多肽疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法，包括以下步骤：(1)构建用于向油菜叶绿体中定点转化外源基因的油菜叶绿体相关DNA序列；(2)合成编码口蹄疫多肽疫苗的基因序列，使该序列与报告基因或具有强免疫源性蛋白的基因串联得到融合的口蹄疫多肽疫苗基因；(3)将步骤(1)构建出来的DNA序列与步骤(2)合成的融合的口蹄疫多肽疫苗基因重组，使融合的疫苗基因序列位于油菜叶绿体相关DNA序列的中间；(4)将步骤(3)中重组得到的DNA片段插入到克隆载体的多克隆位点上，作为口蹄疫多肽疫苗基因油菜叶绿体定点转化载体；和(5)用步骤(4)得到的转化载体转化油菜，获得叶绿体表达口蹄疫多肽疫苗的转基因植物。