发明名称 |
一种对玉米进行基因转化的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种对玉米进行基因转化的方法,该方法包括以下步骤:1)将玉米幼胚或愈伤组织浸入添加50-200μM乙酰丁香酮的携带外源基因的农杆菌D-inf溶液中,振荡30-60秒,并放置5-60分钟,取出吸干放到D-AS培养基上,在22-26℃黑暗条件下共培养2-7天;2)把幼胚或愈伤组织移入含有噻孢霉素的无菌水中洗涤并浸泡15-60分钟;3)取出幼胚或愈伤组织放至含噻孢霉素的愈伤诱导培养基上2-7天;4)低压选择培养;5)高压选择培养;6)诱导形成胚状体;7)将形成胚状体的再转入到分化培养基上进行分化,得到再生的转基因植物。 |
申请公布号 |
CN1429904A |
申请公布日期 |
2003.07.16 |
申请号 |
CN02158758.2 |
申请日期 |
2002.12.26 |
申请人 |
中国农业大学 |
发明人 |
王国英;张荣 |
分类号 |
C12N15/09;C12N15/87;C12N5/00;A01H1/00;A01H4/00 |
主分类号 |
C12N15/09 |
代理机构 |
北京纪凯知识产权代理有限公司 |
代理人 |
关畅 |
主权项 |
1、一种对玉米进行基因转化的方法,包括以下步骤:1)将玉米幼胚或愈伤组织浸入添加50-200μM携带外源基因的农杆菌D-inf溶液中,振荡30-60秒,并放置5-60分种,取出吸干菌液并放到D-AS培养基上,在22-26℃黑暗条件下共培养2-7天;2)把共培养后的幼胚或愈伤组织移入含有150-250mg/L噻孢霉素的无菌水中,洗涤1-3次,最后一次在含有150-250mg/L噻孢霉素的无菌水中浸泡15-60分钟;3)取出幼胚或愈伤组织放至含150-250mg/L噻孢霉素的愈伤诱导培养基上2-7;4)低压选择,将转化受体移入加有低浓度筛选剂的筛选培养基上培养2周;5)高压选择,将转化受体移入加有高浓度筛选剂的筛选培养基上培养3周,共进行2-3轮;6)将选择到的抗性愈伤组织转到胚状体诱导培养基上,诱导形成胚状体;将形成胚状体的再转入到分化培养基上进行分化,得到转基因植物。 |
地址 |
100094北京市海淀区圆明园西路2号 |