发明名称 一种对玉米进行基因转化的方法
摘要 本发明公开了一种对玉米进行基因转化的方法,该方法包括以下步骤:1)将玉米幼胚或愈伤组织浸入添加50-200μM乙酰丁香酮的携带外源基因的农杆菌D-inf溶液中,振荡30-60秒,并放置5-60分钟,取出吸干放到D-AS培养基上,在22-26℃黑暗条件下共培养2-7天;2)把幼胚或愈伤组织移入含有噻孢霉素的无菌水中洗涤并浸泡15-60分钟;3)取出幼胚或愈伤组织放至含噻孢霉素的愈伤诱导培养基上2-7天;4)低压选择培养;5)高压选择培养;6)诱导形成胚状体;7)将形成胚状体的再转入到分化培养基上进行分化,得到再生的转基因植物。
申请公布号 CN1429904A 申请公布日期 2003.07.16
申请号 CN02158758.2 申请日期 2002.12.26
申请人 中国农业大学 发明人 王国英;张荣
分类号 C12N15/09;C12N15/87;C12N5/00;A01H1/00;A01H4/00 主分类号 C12N15/09
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 关畅
主权项 1、一种对玉米进行基因转化的方法,包括以下步骤:1)将玉米幼胚或愈伤组织浸入添加50-200μM携带外源基因的农杆菌D-inf溶液中,振荡30-60秒,并放置5-60分种,取出吸干菌液并放到D-AS培养基上,在22-26℃黑暗条件下共培养2-7天;2)把共培养后的幼胚或愈伤组织移入含有150-250mg/L噻孢霉素的无菌水中,洗涤1-3次,最后一次在含有150-250mg/L噻孢霉素的无菌水中浸泡15-60分钟;3)取出幼胚或愈伤组织放至含150-250mg/L噻孢霉素的愈伤诱导培养基上2-7;4)低压选择,将转化受体移入加有低浓度筛选剂的筛选培养基上培养2周;5)高压选择,将转化受体移入加有高浓度筛选剂的筛选培养基上培养3周,共进行2-3轮;6)将选择到的抗性愈伤组织转到胚状体诱导培养基上,诱导形成胚状体;将形成胚状体的再转入到分化培养基上进行分化,得到转基因植物。
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