核酸间差异的检测方法

摘要

本发明提供了用于检测两相关核酸序列间存在或不存在差异的方法。在这些方法中，靶核酸和参照核酸在特定条件下进行接触，从而形成具有能够迁移的支链的型核酸复合体。在这样的接触条件下，如果靶核酸和参照核酸是完全相同的，那么支链迁移就能够完成，从而完成完整的链交换。如果靶核酸和参照核酸是不同的，就不能完成支链迁移，从而形成稳定的型复合体。检测到稳定的型复合体就能确定核酸间差异的存在。可以利用与这些复合体进行特异性结合的分子、利用凝胶电泳或通过对稳定的型复合体进行特异性分离对此稳定的型复合体进行检测。

主权项

1.检测两个相关多核苷酸序列间是否存在差异的方法，该方法包括：(a)形成包含有以双链体形式存在的所述两个多核苷酸序列的 十字型复合体；(b)将该十字型复合体置于支链迁移条件下，其中，如果所述 两个相关核酸序列间存在差异，该十字型复合体的支链迁 移就停止，此十字型复合体就稳定存在；如果所述两个相 关核酸序列间不存在任何差异，该十字型复合体的支链迁 移就会继续，直至完成完整的链交换，并且该十字型复合 体解离为两个双链体核酸，从而形成一稳定的十字型复合 体；(c)将所述稳定的复合体或支链迁移后的其解离的双链体产物 置于特定的条件下，在此条件下，可选择性识别十字型复 合体的第一种试剂与十字型复合体能够进行特异性结合， 其中，该试剂与该十字型复合体的结合产生了可检测的信 号；及(d)对该第一种试剂与该十字型复合体特异性结合时产生的信 号进行检测，以此来指示该十字型复合体的存在，此信号 与所述核酸序列间差异的存在相关，该信号不能检测到则 与所述核酸序列间缺乏差异相关。