一种戊二酰－7－氨基头孢烷酸酰化酶的制备方法

摘要

一种戊二酰－7－氨基头孢烷酸酰化酶的制备方法，将大肠杆菌基因工程菌在培养基中进行摇瓶种子培养，发酵种子培养，发酵培养，再通过离心收集菌体，浸泡提取酶液、板框过滤，超滤浓缩、纯化固定化后得产物；本发明是一种通过利用大肠杆菌基因工程菌发酵生产，可使产物有较高收率的戊二酰－7－氨基头孢烷酸酰化酶(GL－7－ACA ACY)的制备方法。

主权项

1、一种戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的制备方法，将大肠杆菌基因工程菌在培养基中进行摇瓶种子培养，发酵种子培养，发酵培养，再通过离心收集菌体，浸泡提取酶液、板框过滤，超滤浓缩、纯化固定化后得产物；所使用大肠杆菌基因工程菌，GL-7-ACA酰化酶产生菌(代号：E.coli-GLAA2002)，产生菌为Recombinant Escherichia coli BL21(DE3)，GL-7-ACA酰化酶基因来源为Pseudomonas sp；其中摇瓶种子阶段培养基的成分和含量为：胰蛋白胨1％ 酵母膏0.5％ 氯化钠1.0％发酵种子培养基的成分和含量：酵母膏1.5％ 氯化铵0.24％ 苹果酸0.22％ 磷酸二氢钾0.68％发酵培养：培养基成分及含量：氯化铵0.6％ 酵母膏2.4％ 乳糖0.5％ 泡敌0.05％