通过交叉物种核移植制备的胚胎或干样细胞

摘要

本发明提供一种核转移的方法，涉及将分化的供体细胞核与相容的(与供体细胞相同物种的)细胞质和/或线粒体一起移植到与供体细胞不同物种的去核卵母细胞中。所获核移植单位用于制备等基因胚胎干细胞，尤其是人等基因胚胎细胞或干细胞。这些胚胎细胞或干样细胞对于制备目的分化细胞以及，例如通过同源重组在该细胞的基因组特异位点处，引入、除去或修饰目的基因是有用的。这些细胞可以含有异源基因，在细胞移植治疗和细胞分化的体外研究中尤其有用。通过导入相容的细胞质或线粒体DNA(供体细胞或细胞核相同物种的)提高核转移的效率。本发明还提供了通过遗传改变供体细胞以抑制细胞凋亡，选择特定的细胞周期和/或在增强胚胎生长和发育的条件下培养，提高核移植效率的方法。

主权项

1.制备胚胎或干样细胞的方法，包括以下步骤：(i)在适于核转移(NT)单位形成的条件下，将供体人或哺乳动物分化细胞或细胞核插入受体动物卵母细胞中，其中该卵母细胞来源于不同于该人或哺乳动物细胞的动物物种，其中内源卵母细胞细胞核在供体细胞或细胞核的导入之前，与之同时，或之后被去除或失活；(ii)激活所获的核转移单位；(iii)此外向所述卵母细胞中插入源于供体细胞或细胞核相同物种卵母细胞或卵裂球的细胞质(“相容的细胞质”)；(iv)培养所述激活的核转移单位直到其超过二细胞发育阶段为止；和(v)培养从所述培养的NT单位获得的细胞以获取胚胎或干样细胞。